SN-38

SN-38은 CPT-11의 생물학적 활성 대사 물질입니다. 이 화합물은 DNA topoisomerase I의 가장 강력한 억제를 유발하며, CPT, 그리고 CPT-11 순으로 나타납니다. CPT-11은 이완된 DNA의 위치를 용량 의존적으로 잘린 DNA 방향으로 이동시키지만, 이 화합물과 CPT는 이완된 DNA의 위치에 영향을 미치지 않습니다. 이는 DNA 합성을 용량 의존적 및 시간 의존적으로 억제합니다. 이 화학 물질의 DNA 합성에서 각각의 IC50 값은 0.077 µM입니다. RNA 합성에 대한 억제 효과는 DNA 합성보다 적으며 단백질 합성은 억제하지 않습니다. 이 대사 물질은 P388 세포에서 빈번한 DNA 단일 가닥 절단을 유발했습니다. [1]

경구 투여 후, 이 화합물의 최고 농도는 1시간 이내에 발생하며, 1000 ng/mL에서 생쥐 혈장 내 비결합 락톤의 백분율은 3.4 +/- 0.67%인 반면, 100 ng/mL에서는 비결합 백분율이 1.18 +/- 0.14%입니다. 인간 신경모세포종 이종이식을 지닌 생쥐의 락톤 AUC는 종양을 지니지 않은 동물보다 더 높습니다. [2]

• Topoisomerase I 분석

  Topoisomerase I 1단위 (이 연구 조건 하에서 0.5 μg SV40 DNA의 완전한 이완을 위한 최소량), 시험 화합물 0.5 μL, SV40 DNA 0.5 μg을 반응 완충액에 순차적으로 첨가합니다. 반응 완충액은 25 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM KC1, 5 mM MgCl₂, 0.25 mM EDTA 이나트륨 염, 0.25 mM DTT (dithiothreitol), 15 μg/mL 소 혈청 알부민, 5% 글리세롤로 구성됩니다. 그 후, 반응 혼합물 (50 μL)을 37 °C에서 10분 동안 배양하고, 반응은 1% SDS (sodium dodecyl sulfate), 20 mM EDTA 이나트륨 염, 0.5 mg/mL 프로테이나제 K로 구성된 용액 7.5 μL로 37 °C에서 추가로 30분 동안 처리하여 종료합니다. 샘플은 10 mM Na₂HPO₄, 31.3% sucrose, 0.3% bromophenol blue를 포함하는 로딩 버퍼 5 μL와 혼합됩니다. 이완된 (form Ir) DNA는 0.8% 아가로스 젤에서 50 mA, 20 V로 17시간 동안 2 μg/mL CHQ, 10 mM EDTA, 30 mM NaH₂PO₄, 36 mM Tris-HCl (pH 7.8) 존재 하에 전기영동하여 초나선형 (form I) 및 잘린 (form II) DNA와 분리됩니다. 전기영동 후, 젤은 0.05% 에티듐 브로마이드로 염색하고 UV 라이트 (302 nm)로 촬영합니다. DNA 양은 덴시토미터를 사용하여 정량화됩니다.

• 세포주

  A-172, U-87, and LA-567

• 농도

  0 -1000 nM

• 배양 시간

  48 h

• 방법

  MTT assay

• 동물 모델

  Male Sprague-Dawley rats

• 용량

  10 mg/kg

• 투여

  i.v.