Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다. * Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다. * 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)
원액 준비
생물학적 활성
설명
Suplatast Tosylate (IPD-1151T, Suplatast Tosilate)는 IgE 생성, IL-4 및 IL-5 합성을 IC50 100 μM 이상으로 억제하는 새로운 캡슐형 항천식제입니다.
표적
IL-4 (Cell-free assay)
IL-5 (Cell-free assay)
>100 μM
>100 μM
시험관 내(In vitro)
Suplatast tosilate는 분리된 마우스 비장 B 세포와 사람 말초혈액 B 세포에서 IC50 >100 nM로 항체 생성에 대한 억제 효과를 나타냅니다. Suplatast tosilate는 마우스 및 사람의 사이토카인 생성, IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-5 및 IL-10을 IC50 >100 nM로 억제합니다. SN-4에 의해 매개되는 Cryj1 의존성 IgE 합성 유도는 자가 B 세포에서 Suplatast tosilate (1 및 10 µg/ml)에 의해 농도 의존적으로 억제됩니다. Cryj1과 함께 SN-4에 의해 3일 동안 자가 APC 존재하에서 자극된 IL-4 생성과 정상 공여자로부터 PHA 자극 PBMC에 의해 생성된 IL-4는 Suplatast tosilate (1 및 10 μg/mL)에 의해 농도 의존적으로 효과적으로 억제됩니다. Suplatast tosilate는 미성숙 수지상 세포 (DCs)에서 CD1a, CD80 및 CD86의 발현과 성숙 DCs에서 CD1a, CD80, CD83 및 CD86의 발현을 유의하게 억제합니다. Suplatast tosilate는 또한 CCL17, IL-12p70 및 IL-12p40의 분비를 유의하게 억제하지만, IL-10의 분비는 영향을 받지 않습니다. Suplatast tosilate 처리된 DCs에 대한 동종 CD4(+) T 세포의 증식 반응은 억제됩니다. 더욱이, Suplatast tosilate 처리된 DCs는 IFN-감마 및 IL-5를 생성하기 위해 CD4(+) T 세포를 자극하는 능력이 손상됩니다.
생체 내(In Vivo)
Suplatast tosilate (100 mg/kg/100 μL)는 BALF에서 총 세포 및 호산구 수를 유의하게 감소시키고 (약 -40%) 항원 유도 BHR의 발달을 거의 완전히 억제합니다. 조직학적 소견은 폐의 점막하 세포 침윤 감소를 확인하고 기관지 상피 세포 손상의 현저한 억제를 보여줍니다. 난백 특이 IgE는 약간 감소하지만 유의하게 감소합니다. Suplatast tosilate로 처리된 마우스의 BALF에서 IL-4, IL-5 및 IL-13 수치는 미처리 마우스에 비해 유의하게 감소했습니다.
사이토카인 생성을 위한 배양은 37°C에서 다음과 같이 설정됩니다: SN-4와 자가 APC (각각 1 × 105 세포/웰)의 혼합물은 원형 바닥 마이크로 플레이트에서 총 0.2 mL 부피로 50 μg/mL의 Cry j1과 함께 3일 동안 배양됩니다; 정상 공여자로부터의 PBMC (2 × 10 5 세포/웰)는 평평한 바닥 96웰 마이크로 플레이트에서 총 0.2 mL 부피로 10 μg/ml의 PHA와 함께 24시간 동안 배양됩니다; 그리고 정상 공여자로부터의 정제된 T 세포 (1 × 105 세포/웰)는 평평한 바닥 24웰 플레이트에 5 µg/ml 농도로 고정된 항-CD3 mAb와 함께 총 1 ml 부피로 24시간 동안 배양됩니다. 배양 상층액의 사이토카인은 다음 상업적으로 이용 가능한 키트로 정량적으로 분석됩니다: IL-4 및 IFN-γ. 분석의 민감도는 IL-4의 경우 30 pg/mL이고 IFN-γ의 경우 1 U/mL입니다.
Allogeneic responder CD4+ T cells obtained from healthy subjects are purified from PBMCs by negative depletion of CD14+, CD16+, CD19+, CD56+, and CD8+ cells using magnetic cell separation system micro-beads and columns. After 7 days of culture with GM-CSF and IL-4, iDCs differentiated from monocytes in the presence or absence of Suplatast tosilate (10 and 100 mg/ mL) are co-cultured with purified 1×10 5 allogeneic CD41 T cells at varying ratios of iDCs in 96-well round bottomed culture plates for 5 days. Cells are pulsed with 1 μCi of 3H-methylthymidine for the last 8 hours of the culture period. Incorporated radioactivity is counted with a liquid scintillation counter, and proliferative responses are expressed as the mean 3 H-methylthymidine incorporation (counts per minutes) of triplicate wells_SEM. Proliferation of DCs alone or CD4+ T cells alone is also assessed.
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