Torin 1

카탈로그 번호S2827 배치:S282703

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기술 자료

화학식

C35H28F3N5O2
분자량 607.62 CAS 번호 1222998-36-8
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 2 mg/mL (3.29 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Torin 1은 무세포 분석에서 IC50이 2 nM/10 nM인 강력한 mTORC1/2 억제제이며, PI3K보다 mTOR에 대해 1000배 선택성을 보입니다.
표적
mTORC1
(Cell-free assay)		 mTOR
(Cell-free assay)		 DNA-PK
(Cell-free assay)		 mTORC2
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 더 보기
2 nM 4.32 nM 6.34 nM 10 nM 171 nM
시험관 내(In vitro) Torin1은 세포 내에서 2 nM 및 10 nM 농도에서 각각 mTORC1 및 mTORC2 기질의 인산화를 억제합니다. 또한, Torin1은 PI3K(EC50 = 1800 nM)보다 mTOR에 대해 1000배 더 높은 선택성을 보이며, 다른 450개 단백질 키나아제에 비해 100배 더 높은 결합 선택성을 나타냅니다. Torin1은 라파마이신 저항성 기전을 통해 세포 주기 정지를 유발하며, 이는 mTORC2와도 독립적입니다. Torin1은 라파마이신보다 mTORC1 의존적 표현형을 더 완전하게 방해합니다. mTORC1의 라파마이신 저항성 기능은 캡 의존적 번역에 필수적입니다. 최근 연구에서는 Torin1이 인간 내분비 세포주 BON에서 MEK/ERK/c-Jun 경로의 활성화를 통해 뉴로텐신 분비와 유전자 발현을 증가시킨다고 보고되었습니다.
생체 내(In Vivo) Torin1은 U87MG 이종이식 모델에서 20 mg/kg 용량으로 효과적이며, 종양 및 말초 조직에서 mTOR의 하류 이펙터에 대한 우수한 약력학적 억제를 보여줍니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:[1]
  • mTORC1 및 mTORC2 In Vitro 키나아제 분석

    가용성 mTORC1을 생산하기 위해 N-말단에 FLAG-태그된 Raptor를 안정적으로 발현하는 HEK-293T 세포주는 수포성 구내염 바이러스 G-슈도타이핑 MSCV 레트로바이러스를 사용하여 생성됩니다. mTORC2의 경우, N-말단에 FLAG-태그된 Protor-1을 안정적으로 발현하는 유사한 HeLa 세포가 생성됩니다. 두 복합체는 50 mm HEPES, pH 7.4, 10 mm 피로인산나트륨, 10 mm β-글리세로포스페이트나트륨, 100 mm NaCl, 2 mm EDTA, 0.3% CHAPS에서 세포를 용해하여 정제됩니다. 세포는 4 °C에서 30분 동안 용해되고, 불용성 분획은 13,000 rpm으로 10분 동안 미세원심분리하여 제거됩니다. 상층액은 FLAG-M2 단일클론 항체-아가로스와 1시간 동안 배양된 후 용해 버퍼로 세 번, 최종 농도 0.5 M NaCl을 포함하는 용해 버퍼로 한 번 세척됩니다. 정제된 mTORC1은 50 mm HEPES, pH 7.4, 100 mm NaCl에 100 μg/mL 3×FLAG 펩타이드를 사용하여 용출됩니다. 용출액은 분주하여 -80 °C에 보관할 수 있습니다. 기질 S6K1 및 Akt1이 정제됩니다. 키나아제 분석은 30 °C에서 20분 동안 20 μL의 최종 부피로 수행되며, 키나아제 버퍼(25 mm HEPES, pH 7.4, 50 mm KCl, 10 mm MgCl2, 500 μm ATP) 및 150 ng의 불활성 S6K1 또는 Akt1을 기질로 포함합니다. 반응은 80 μL의 샘플 버퍼를 첨가하여 중단하고 5분 동안 끓입니다. 샘플은 이어서 SDS-PAGE 및 면역블로팅으로 분석됩니다.
세포 분석:[1]
  • 세포주

    MEFs

  • 농도

    ~250 nM

  • 배양 시간

    4 days

  • 방법

    Cell viability is assessed with the CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay. On Day 0, 96-well plates are seeded with 500 cells per well and grown overnight. On Day 1, cells are treated with the appropriate compounds and subsequently analyzed on Days 3-5. For analysis, plates are incubated for 60 min at room temperature; 50 μL of CellTiter-Glo reagent is added to each well, and plates are mixed on an orbital shaker for 12 min. Luminescence is quantified on a standard plate luminometer.

동물 연구:[2]
  • 동물 모델

    U87MG xenograft model

  • 용량

    20 mg/kg

  • 투여

    Administered via i.p. once daily

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19150980/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20860370/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21508335/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20508131/

고객 제품 검증

Huh-7.5 cells were treated with increasing concentration of Torin 1, a known autophagy inducer, and the autophagy response was assessed by measuring LC3II and p62 levels.

데이터 출처 [ Am J Pathol , 2014 , 184(1), 214-29 ]

Flag-tagged SENP3 was immunoprecipitated from HeLa cells and used for in vitro phosphorylation assay with [32P]ATP with either the mock-treated or Torin1-treated mTOR/Raptor/MLST8 complex. (Upper) The samples then were subjected to SDS-PAGE, followed by autoradiography. mTOR autophosphorylation is indicated by an asterisk. (Lower) Immunopurified SENP3 was monitored by Western blotting with anti-Flag antibody.

데이터 출처 [ Mol Cell Biol , 2014 , 34(24), 4474-84 ]

Representative Western blots showing LC3 in PP242 (PP) or Torin1 (Tor) treated HepG2 cells. HepG2 cells were treated with 10 uM PP242 or 0.1 uM Torin1 for 24 h.

데이터 출처 [ Biochem Biophys Res Commun , 2014 , 10.1016/j.bbrc.2014.05.047 ]

Bone marrow derived macrophages were pre-treated with 10nM Torin 1 for 1h prior to LPS treatment (100 ng/ml). TNF-a production was analyzed 24h later.

, , Lim Hsiu Kim, Lina from National University of Singapore

Sellecks Torin 1 인용됨 259 출판물

GPNMB disrupts SNARE complex assembly to maintain bacterial proliferation within macrophages [ Cell Mol Immunol, 2025, NONE] PubMed: 40038549
DMXL1 promotes recruitment of V1-ATPase to lysosomes upon TRPML1 activation [ Nat Struct Mol Biol, 2025, 10.1038/s41594-025-01581-x] PubMed: 40527988
RNA G-quadruplexes control mitochondria-localized mRNA translation and energy metabolism [ Nat Commun, 2025, 16(1):3292] PubMed: 40195294
S100P is a ferroptosis suppressor to facilitate hepatocellular carcinoma development by rewiring lipid metabolism [ Nat Commun, 2025, 16(1):509] PubMed: 39779666
USP5 stabilizes YTHDF1 to control cancer immune surveillance through mTORC1-mediated phosphorylation [ Nat Commun, 2025, 16(1):1313] PubMed: 39900921
Dual mechanism of autophagy gene repression by PHF23 and therapeutic potential of its inhibition in protein aggregation disorders [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(22)gkaf1317] PubMed: 41359382
Excessive autophagic degradation of MYLK3 causes sunitinib-induced cardiotoxicity [ Autophagy, 2025, 1-20.] PubMed: 40568844
ESCRT III-mediated lysosomal repair improve renal tubular cell injury in cisplatin-induced AKI [ Autophagy, 2025, 1-18.] PubMed: 40152606
TBK1 is a signaling hub in coordinating stress-adaptive mechanisms in head and neck cancer progression [ Autophagy, 2025, 1-23.] PubMed: 40114316
S-palmitoylation modulates ATG2-dependent non-vesicular lipid transport during starvation-induced autophagy [ EMBO J, 2025, 44(9):2596-2619] PubMed: 40128367

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