Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다. * Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다. * 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)
원액 준비
생물학적 활성
설명
TTNPB는 강력한 RAR 작용제이며, 인간 RARα, β 및 γ에 대해 각각 5.1 nM, 4.5 nM 및 9.3 nM의 IC50으로 [3H]tRA 결합을 억제합니다.
표적
RARβ (cell-free assay)
RARα (cell-free assay)
RARγ (cell-free assay)
4.5 nM
5.1 nM
9.3 nM
시험관 내(In vitro)
TTNPB는 핵 Retinoid Receptor에 높은 친화도로 결합하며, mRARα, β, γ에 대해 각각 3.8 nM, 4.0 nM 및 4.5 nM의 IC50으로 [3H]tRA 결합을 억제합니다. 이 화합물은 조건 배지를 사용하여 72시간 후 JEG-3 세포에서 마우스 RAR의 전사 활성화를 증가시키며, mRARα, β, γ에 대해 각각 2.0 nM, 1.1 nM 및 0.8 nM의 EC50을 보입니다. 이는 G1 세포 주기 차단을 유도하여 정상 인간 유방 상피 세포(HMEC) 및 에스트로겐 수용체 양성(ER-양성) 유방암 세포의 성장을 억제합니다. 이 화학 물질은 ES-D3 세포 분화에서 농도 의존적 감소를 유발합니다.
생체 내(In Vivo)
TTNPB (0.25 mg/kg)는 세포 아폽토시스를 유도하여 MXT-HS 및 MXT-HI 모델 모두에서 성장 억제를 유발합니다.
결합 분석은 이전에 설명된 바와 같이 수행됩니다(Allenby et al., 1993, 1994). 간단히 말해, 표지된 및 비표지된 레티노이드를 에탄올에 핵졸 또는 세포질 분획에 첨가하여 첨가된 에탄올의 총량이 모든 튜브에서 일정하고 배양 부피의 2%를 초과하지 않도록 합니다. 수용체 준비물은 레티노이드와 함께 4°C에서 4-6시간 동안 배양됩니다. 평형에 도달한 후 Sephadex PD-10 탈염 컬럼을 사용하여 결합된 방사성 리간드와 유리 방사성 리간드를 분리합니다. 경쟁적 결합 분석을 위해, 다양한 농도의 비표지 경쟁 리간드를 고정된 농도의 [3H]tRA (특이 활성 49.3 Ci/mmol) 또는 [3H]9-cis RA (특이 활성 24.0 Ci/mmol) 존재하에 적절한 핵졸 또는 세포질과 함께 배양합니다. 핵 Retinoid Receptor 결합 분석을 위한 [3H]tRA 및 [3H]9-cis RA의 최종 농도는 5 nM입니다. CRABP 결합 분석을 위한 [3H]tRA의 최종 농도는 30 nM입니다. IC50은 위에 설명된 바와 같이 계산됩니다(DeLean et al., 1978). 포화 역학을 위해, 증가하는 농도의 방사성 표지 리간드 ([3H]tRA 특이 활성 49.3 Ci/mmol, [3H]this compound 특이 활성 5.5 Ci/mmol)를 해당 비표지 레티노이드의 100배 몰 과량 존재(비특이적 결합) 또는 부재(총 결합)하에 적절한 수용체 하위 유형의 핵졸에 첨가합니다. 특정 결합은 총 결합에서 비특이적 결합을 뺀 것으로 정의됩니다. 포화 역학은 이전에 설명된 바와 같이 계산됩니다(Scatchard, 1949; Grippo and Gudas, 1987; Levin et al., 1992).
Human mammary epithelial cells are maintained in Mammary Epithelial Basal Medium (MEBM) supplemented with the Mammary Epithelial Growth Media (MEGM) bullet kit. 184 and 184B5 cells are maintained in MEBM sodium-bicarbonate free (MEBM-SBF) supplemented with the MEGM bullet kit, isoproterenol (10 μM), and transferrin (5 μg/ml). MCF10A cell lines are maintained in DME/F12 containing 5% heat inactivated horse serum, penicillin/streptomycin (100 μg/ml and 100 μg/ml), hydrocortisone (1.4μM), insulin (10 μg/ml), choleratoxin (100 ng/ml), and EGF (20 ng/ml). Breast cancer cell lines are maintained in Improved MEM Zinc Option containing 10% fetal bovine serum, 1% glutamine, and 1% penicillin/streptomycin. For growth assays, cells are treated with the different retinoids for the specified number of days with media and this compound changes every other day in T47D cells and every 2 days in 184 cells. Cell proliferation is measured according to the protocol for the CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay. This colorimetric assay determines the number of viable cells in a sample. Each point represents samples done in quadruplicate.
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