Verinurad (RDEA3170)

Verinurad (RDEA3170)은 25 nM의 IC50으로 높은 효능으로 용량 의존적으로 인간 URAT1의 수송 활성을 억제했습니다. 이는 관련 URAT1 동족체 OAT4 및 OAT1을 URAT1에 비해 약 200배 낮은 친화도로 억제했으며, IC50 값은 각각 5.9 μM 및 4.6 μM이었습니다. 인간 URAT1 (IC50=0.025 μM)은 쥐 URAT1 (IC50 = 41 μM)에 비해 이 화합물에 대해 1,640배 더 높은 친화도를 가집니다. 이는 인간 URAT1에 대해 높은 효능을 가지며, 잔기 35, 365 및 481이 모두 그 친화도에 기여합니다. 인간 Phe-365가 쥐 Tyr-365로 대체된 (인간 URAT1-F365Y 또는 h-F365Y) 365번 위치에 키메라 점 돌연변이를 가진 인간 URAT1은 IC50이 4.0 μM으로, 인간 URAT1에 비해 160배 유의하게 낮은 친화도를 가집니다. 한편, 반대 점 돌연변이를 가진 쥐 URAT1 (쥐 URAT1-Y365F 또는 r-Y365F)은 IC50이 2.9 μM으로, 쥐 URAT1에 비해 14배 유의하게 높은 친화도를 가졌습니다[1].

인간에서 Verinurad (RDEA3170) 단회 투여의 흡수는 빠르며, 노출 (Cmax 및 AUC)은 최대 시험 용량까지 용량에 따라 증가합니다. Cmax는 공복 상태에서 투여 후 0.5-0.75시간에 도달하며, 식사 후에는 투여 후 1.25시간으로 약간 지연됩니다. t1/2는 모든 용량에서 약 10-15시간입니다. 연구된 용량에서 잘 용인되었습니다. 전신 순환에서 이 화합물은 광범위한 혈관 외 분포를 가진 고청소율 약물 (CL/F는 ~30-50 L/h 범위)로 나타났습니다. 신장 배설은 소변으로 약 2%–3%에 불과하여, 대부분은 생체 변환을 통해 대사체로 간에서 청소될 가능성이 있음을 시사합니다[2].

• 세포주

  HEK-293T cells

• 농도

  0.1 nM-1 mM

• 배양 시간

  5 min

• 방법

  URAT1 and OAT4 activity assays were performed in assay buffer con- sisting of 25 mM MES pH 5.5 (from a 1 M MES solution adjusted to pH 5.5 with sodium hydroxide), 125 mM sodium gluconate, 4.8 mM potassium gluconate, 1.2 mM monobasic potassium phosphate, 1.2 mM magnesium sulfate, 1.3 mM calcium gluconate and 5.6 mM glucose. Verinurad (RDEA3170) was serially diluted into assay buffer and added to the cells for 5 minutes prior to addition of substrate. URAT1-expressing cells were incubated with 100 μM 14C-uric acid for 10 minutes and OAT4-expressing cells were incubated with 20 μM carboxyfluorescein for 5 minutes. Cells were then washed three times in 25 mM MES pH 5.5/125 mM sodium gluconate, and solubilized in Ultima Gold prior to liquid scintillation counting. Each treatment is measured in triplicate.