Y-27632 Dihydrochloride

Y-27632 2HCl은 ROCK-II를 억제하는 반면, K_i가 각각 26 μM, 25 μM 및 > 250 μM인 PKC, cAMP 의존성 단백질 키나아제 및 미오신 경쇄 키나아제(MLCK)에 대해서는 거의 활성을 보이지 않으며, 다른 Rho-family GTPase 멤버인 Cdc42에 의해 활성화되는 PKA에 대해서도 마찬가지입니다. 이 화합물은 페닐에프린, 히스타민, 아세틸콜린, 세로토닌, 엔도텔린 및 트롬복산을 포함한 다양한 작용제에 의해 유도되는 평활근 수축을 IC50 0.3-1 μM으로 억제하며, Ca²⁺ 민감화를 선택적으로 억제합니다. 이는 배양 세포에서 Rho-유도, p160ROCK-매개 스트레스 섬유 형성을 억제합니다. [1]

이 화학 처리는 농도 의존적으로 Rho-매개 액토미오신 활성화와 MM1 세포의 LPA-자극 침습 활성을 모두 차단합니다. [2]

이 화합물 처리는 풍부한 축삭돌기 형성 시작에 충분할 뿐만 아니라, 축삭 발생의 초기 단계 동안 축삭 성숙을 촉진하며, 축삭 신장은 크게 유지합니다. [3]

인간 배아 줄기(hES) 세포에서 10 μM의 이 화학 처리는 무혈청 현탁(SFEB) 배양에서도 해리 유도 세포사멸을 현저히 감소시키고, 클로닝 효율을 증가시키며(~1%에서 ~27%로), 유전자 전달 후 서브클로닝을 용이하게 하고, SFEB 배양 hES 세포가 생존하여 Bf1⁺ 피질 및 기저 종뇌 전구세포로 분화하도록 합니다. [4]

Y-27632 2HCl 30 mg/kg 경구 투여는 자발적 고혈압 쥐, 신장성 고혈압 쥐, 그리고 데옥시코르티코스테론 아세테이트(DOCA)-염분 고혈압 쥐에서 용량 의존적으로 혈압을 유의하게 감소시킵니다. [1]

이 화합물을 이식된 펌프를 통해 시간당 0.55 μL의 속도로 11일 동안 지속적으로 투여했을 때, 종양 세포 침윤(쥐에서 Val14-RhoA를 발현하는 MM1 세포)이 유의하게 지연됩니다. [2]

ROCK을 억제함으로써, 이 화학 처리는 폐순환에서 저산소증 유발 혈관신생 및 혈관 재형성을 약화시킵니다. [5] 이 화합물로 전처리하는 것은 에를리히 복수 암종을 가진 알비노 마우스에서 종양 형성에 대한 보호 효과를 가집니다. [7]

• 인산화 반응

  p160ROCK은 태그된 전장 단백질로 COS 세포에서 발현되며, 항태그 항체를 사용하여 면역침전됩니다. p160ROCK (30 ng)은 40 μM [γ-³²P]ATP (3.3 Ci/mmol) 및 3 μg의 히스톤 (HF2A), 탈인산화 카제인 또는 MBP와 함께 다양한 농도의 이 화합물 존재 하에 30 °C에서 총 31 μL 부피로 배양됩니다. 0, 5, 10, 20분 간격으로 7 μL의 시료를 취하여 동량의 2 × Laemmli 시료 버퍼와 혼합한 후 SDS-PAGE에 적용합니다. 겔은 코마시 블루로 염색하고 건조한 후 Bioimage Analyzer BAS2000으로 분석합니다. p160ROCK 활성을 50% 억제하는 데 필요한 이 화학 물질의 농도(IC50 값)를 얻습니다. K_i 값은 K_i = IC50/(1 + S/K_m) 방정식에 따라 계산되며, 여기서 S와 K_m은 ATP에 대한 농도와 K_m 값을 나타냅니다.

• 세포주

  hES Cells

• 농도

  10 uM

• 배양 시간

  1 h

• 방법

  Y-27632 2HCl was added to culture medium at 10 uM 1 h before detaching the cells from the feeder layer and also upon seeding the cells onto a new MEF layer.

• 동물 모델

  Male Wistar rats with spontaneous or induced hypertension; Swiss albino mice with Ehrlich ascites carcinoma

• 용량

  30 mg/kg/day (Rat); 0-10 mg/kg (mice)

• 투여

  Orally (Rat); i.p. (Mice)