AZ20 ATM/ATR remmer

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.92%

99.92

Gerelateerde doelwitten	PI3K Akt mTOR GSK-3 DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
Overige ATM/ATR Inhibitoren	Ceralasertib (AZD6738) AZD1390 Berzosertib (VE-822) Lartesertib (M4076) Camonsertib (RP-3500) KU-60019 KU-55933 VE-821 AZD0156 Mirin

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
HT29	Function assay		1 hr	Inhibition of ATR-mediated CHK1 phosphorylation at serine 345 in human HT29 cells after 1 hr in presence of 4-nitroquinoline 1-oxide, IC50=0.05μM	23394205
LoVo	Growth inhibition assay		72 hrs	Growth inhibition of human LoVo cells after 72 hrs by MTS assay, GI50=0.2μM	23394205
MDA-MB-468	Function assay			Inhibition of mTOR-mediated AKT phosphorylation at serine 473 in human MDA-MB-468 cells, IC50=2.4μM	23394205
LoVo	Antitumor assay	50 mg/kg	13 days	Antitumor activity against human LoVo cells xenografted in Swiss nu/nu mouse assessed as tumor growth inhibition at 50 mg/kg, po qd for 13 days relative to control	23394205
LoVo	Antitumor assay	25 mg/kg	13 days	Antitumor activity against human LoVo cells xenografted in Swiss nu/nu mouse assessed as tumor growth inhibition at 25 mg/kg, po bid for 13 days relative to control	23394205
HT29	Function assay		60 mins	Inhibition of ATR in human HT29 cells after 60 mins by Hoechst 33258 staining-based assay, IC50=0.061μM	30346772
LoVo	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human LoVo cells after 72 hrs by MTS assay, GI50=0.2μM	30346772
MDA-MB-468	Function assay			Inhibition of mTOR in human MDA-MB-468 cells assessed as decrease in 70S6K S235/236 phosphorylation, IC50=0.72μM	30346772
HT-29	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HT-29 cells after 72 hrs by MTS assay, GI50=0.97μM	30346772
LoVo	Function assay	25 mg/kg	8 hrs	Plasma concentration in Swiss nu/nu mouse xenografted with human LoVo cells at 25 mg/kg, po bid after 8 hrs, Cp=1.8μM	30346772
MDA-MB-468	Function assay			Inhibition of mTOR in human MDA-MB-468 cells assessed as decrease in AKT phosphorylation at S473 residue, IC50=2.4μM	30346772
LoVo	Function assay	50 mg/kg	8 hrs	Plasma concentration in Swiss nu/nu mouse xenografted with human LoVo cells at 50 mg/kg, po qd after 8 hrs, Cp=3.5μM	30346772
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	412.51	Formule	C₂₁H₂₄N₄O₃S	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1233339-22-4	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CC1COCCN1C2=NC(=NC(=C2)C3(CC3)S(=O)(=O)C)C4=C5C=CNC5=CC=C4

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 83 mg/mL (201.2 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 3 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (12.12mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	0.410mg/ml (0.99mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	ATR-selective inhibitor with high permeability and good stability.
Targets/IC₅₀/Ki	ATR (Cell-free assay) 5 nM mTOR (Cell-free assay) 38 nM
In vitro	AZ20 vertoont een goede selectiviteit tegen alle PI3K-isoformen, samen met ATM en DNA-PK. In vitro verlaagt deze verbinding de pChk1 Ser345-, pChk1 Ser317- en pChk1 Ser296-niveaus op een concentratieafhankelijke manier. Langdurige blootstelling aan deze chemische stof verhoogt de pan-nucleaire kleuring van γH2AX, wat duidt op replicatiestress. Dit gaat gepaard met S-fase-arrest en een toename van gefosforyleerd histone H3. Het induceert groeiremming en celdood in vitro en het activiteitsprofiel is verschillend van dat van andere cytotoxische middelen. Het cytotoxische effect van dit middel kan worden verhoogd in combinatie met de selectieve ATM-remmer KU-60019.
In vivo	Vrouwelijke naakte muizen met LoVo-tumoren werden behandeld met AZ20 oraal in een dosis van 25 mg/kg tweemaal daags of 50 mg/kg eenmaal daags gedurende 13 dagen, wat leidde tot een significante tumorremming. Dit ging gepaard met een aanhoudende verhoging van de pan-nucleaire kleuring van γH2AX in xenograftweefsel, maar een voorbijgaande toename in het muizenbeenmerg bij therapeutische doses, wat duidt op een gunstige therapeutische index. Deze verbinding wordt beoordeeld op het potentieel voor geneesmiddel-geneesmiddelinteractie (DDI), specifiek door remming van cytochroom P450-enzymen. Er is vastgesteld dat het het cytochroom 3A4-gemedieerde metabolisme van midazolam met 50% remt bij 10 μM. Deze chemische stof heeft een respectabele biologische beschikbaarheid in een PK-studie met lage doses bij ratten.
Referenties	[1] http://cancerres.aacrjournals.org/cgi/content/meeting_abstract/72/8_MeetingAbstracts/1823 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23394205/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	γH2AX / RRM1 / RRM2 p-CDK1 / CDK1 / p-CDK2 / CDK2		28176818
Growth inhibition assay	IC50		28176818

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
If I want to completely block the kinase activity from the in vitro cell lines, how much concentration of it should I use?

Antwoord:
IC50 5nM was quoted from a previous publication in which the author tested its IC50 in a cell-free assay. In cell culture, many factors, such as membrane permeability and target protein concentration, may affect the efficiency. Each cell line responds to the same compound differently, and it is very difficult to predict the optimized concentration simply based on cell-free data. In cell culture experiments, the required concentration is usually higher. We recommend that you perform a pilot experiment and test different concentrations (50nM to 500μM) to get the optimized condition.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 412.51