Name: GANT61
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8075
Rating: 5 (102 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.91%

99.91

Gerelateerde doelwitten	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Overige Hedgehog/Smoothened Inhibitoren	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Purmorphamine Cyclopamine (11-Deoxojervine) SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D PF-5274857

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
Shh Light2	Function assay			Inhibition of SHH in mouse Shh Light2 cells by GLI-responsive firefly luciferase reporter gene assay, IC50 = 5 μM.	19309080
Shh-L2	Function assay			Inhibition of Hedgehog signaling in human Shh-L2 cells, IC50 = 5 μM.	17494766
NIH 3T3	Function assay			Inhibition of Hh signaling pathway in Shh-LIGHT2 incorporated mouse NIH 3T3 cells assessed as downregulation of Gli1 gene expression by luciferase reporter gene assay, EC50 = 5 μM.	26976215
HeLa	Function assay		4.5 hrs	Inhibition of Ebolavirus glycoprotein/matrix protein VP40 entry in human HeLa cells after 4.5 hrs beta-lactamase reporter assay, IC50 = 6.83 μM.	29624387
TM3	Function assay		48 hrs	Inhibition of Hh signaling pathway in mouse TM3 cells assessed as downregulation of Gli1 gene expression after 48 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 9.27 μM.	26976215
Rh30	Function assay		24 hrs	Inhibition of human Gli1-mediated transcriptional activity in human Rh30 cells after 24 hrs by luciferase reporter gene assay, IC50 = 40 μM.	20605720
HEK293	Function assay			Reduction of GLI2 mediated transcription in HEK293 cells by luciferase reporter assay	17494766
NIH3T3	Function assay			Inhibition of GLI1 induced hedgehog signaling in mouse NIH3T3 cells	17494766
HEK293	Function assay			Inhibition of beta galactosidase in HEK293 cells	17494766
MEF	Function assay			Reduction in expression of Hedgehog target gene Hip1 in Sufu deficient mouse MEF cells	17494766
NIH3T3	Function assay	10 uM		Inhibition of Hedgehog/Gli1 mediated transformation in mouse NIH3T3 cells at 10 uM	17494766
PANC1	Function assay	5 uM		Reduction in GLI1 expression in human PANC1 cells at 5 uM	17494766
PANC1	Function assay	5 uM		Reduction in PTCH expression in human PANC1 cells at 5 uM	17494766
22Rv	Function assay	5 uM		Reduction in GlI1 expression in human 22Rv cells at 5 uM	17494766
22Rv	Function assay	5 uM		Reduction in PTCH expression in human 22Rv cells at 5 uM	17494766
22Rv	Function assay			Reduction of expression of PTCH mRNA in human 22Rv cells	17494766
HEK293	Function assay			Inhibition of nuclear accumulation of GLI mutant in HEK293 cells	17494766
HEK293	Function assay			Inhibition of nuclear accumulation of wild type GLI in HEK293 cells	17494766
HEK293	Function assay			Reduction of GLI1 mediated transcription in HEK293 cells by luciferase reporter assay	17494766
22Rv	Antitumor assay	50 mg/kg	18 days	Antitumor activity in GLI1 positive human 22Rv cells xenografted mouse model at 50 mg/kg, sc after 18 days	17494766
HEK293	Function assay	30 uM		Inhibition of GLI (unknown origin) expressed in HEK293 cells assessed as reduction in GLI-mediated transcription at 30 uM	25581017
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
SK-N-DZ	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-N-DZ cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
SK-N-SH	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-N-SH cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
SK-N-FI	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-N-FI cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
SK-N-AS	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-N-AS cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
IMR32	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human IMR32 cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
SK-N-BE(2)	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-N-BE(2) cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
SH-SY5Y	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SH-SY5Y cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM.	ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	429.6	Formule	C₂₇H₃₅N₅	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	500579-04-4	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	NSC 136476			Smiles	CN(C)C1=CC=CC=C1CN2CCCN(C2C3=CC=NC=C3)CC4=CC=CC=C4N(C)C

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

Ethanol : 85 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	GLI1 (HEK293T cells expressing GLI1) 5 μM
In vitro	GANT61 is een remmer voor GLI1 en GLI2-ge duceerde transcriptie. Deze verbinding remt de DNA-bindende capaciteit van GLI1. Het remt hedgehog-signalering met een IC50 van 5 μM, vertoont selectiviteit ten opzichte van andere pathways, zoals TNF-signalering/NF κB-activatie, glucocortic oïde receptor gen transactivatie en de Ras–Raf–Mek–Mapk-cascade. Deze chemische stof remde effici ënt de in vitro proliferatie van tumorcellen op een GLI-afhankelijke manier. Het induceert apoptosis in chronische lymfatische leukemiecellen (CLL), maar niet in normale B-lymfocyten. Deze verbinding induceert robuuste cytotoxiciteit en schakelt de clonogeniciteit uit in menselijke darmcarcinoomcellijnen. Het induceert remming van DNA-replicatie in de vroege S-fase in menselijke darmcarcinoomcellijnen, leidend tot DNA-schadesignalering waarbij een ATM–Chk2-as betrokken is en inductie van celdood. Deze chemische stof (30 μM) veroorzaakt groeiremming en apoptosis in acute myelo ïde leukemie (AML) cellen.
Kinase Assay	Dual Luciferase Assay
Kinase Assay	HEK293-cellen worden getransfecteerd met GLI1-expressieplasmide, samen met de reporterplasmiden 12×GliBSLuc en R-Luc op 10 cm platen (dag 0). Vierentwintig uur later worden cellen gezaaid in witte 96-well platen met een heldere bodem met een dichtheid van 15.000 cellen per well. Cellen krijgen de tijd om zich te hechten, en deze verbinding wordt toegevoegd in een finale concentratie van 10 μM in DMSO (0,5% finale DMSO-concentratie) (dag 1,5). Cellen worden nog eens 24 uur gekweekt, vervolgens gelyseerd en daarna geanalyseerd met behulp van de Dual Luciferase kit.
In vivo	Bij naakte muizen ge jecteerd met GLI1-positieve 22Rv1 prostaatkankercellen, induceert GANT61 een groeiregressie totdat er geen tumor meer palpabel is. Bij naakte muizen met SK-N-AS neuroblastoom xenografts, remt deze verbindingbehandeling (orale gavage, 50 mg/kg) de tumorgroei significant op dag 12, aangezien het tumorvolume is gereduceerd tot 63% vergeleken met controles.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17494766/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20603613/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21135115/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21747117/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22398221/ [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22949014/