Name: PF-5274857
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2777
Rating: 5 (3 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.86%

99.86

Gerelateerde doelwitten	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Overige Hedgehog/Smoothened Inhibitoren	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Purmorphamine Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT61 SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	436.96	Formule	C₂₀H₂₅ClN₄O₃S	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1373615-35-0	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CC1=CC(=C(N=C1)C2=CC(=NC=C2Cl)N3CCN(CC3)C(=O)CCS(=O)(=O)C)C

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 93 mg/mL (212.83 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : 93 mg/mL

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	Saline Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	30.000mg/ml (68.66mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 30 mg of this product to 1 ml of physiological saline (0.9% NaCL solution), mix evenly to make it clear, The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened 4.6 nM(Ki) Smoothened 5.8 nM
In vitro	PF-5274857 remt de Shh-geïnduceerde Hh-padactiviteit volledig met een IC50 van 2,7 nM, gemeten door de transcriptieactiviteit van Smo downstream-gen Gli1 in MEF-cellen. De μ-opioïdereceptor wordt zwak geremd door deze verbinding met een dissociatieconstante van 36 μM, vervolgens bepaald in een functionele assay.
Kinase Assay	Biochemische assays
Kinase Assay	HEK293-cellen die humaan Smo (aminozuren 181-787) overexpresseren, worden gekweekt in Dulbecco's Modified Eagle's Media (DMEM) aangevuld met 10% FBS, Pen–Strep en 0,1 mg/mL hygromycine tot 90% confluentie. Na wassen met koud Dulbecco's PBS wordt het celpellet geresuspendeerd in membraanbereidingsbuffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 250 mM sucrose met Roche complete proteasecocktail) en gehomogeniseerd. Het homogenaat wordt gecentrifugeerd en het celpellet wordt geresuspendeerd in assaybuffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 100 mM NaCl, 25 mM MgCl₂, 1 mM EDTA en 0,1% proteasevrij runderalbumine) en gehomogeniseerd in een glazen weefselstamper. Totaal eiwit in de membraanbereiding die Smo bevat, wordt bepaald met behulp van de Pierce BCA-eiwittest. Voor de competitieve bindingsassay wordt 100 μL assaybuffer gedurende 10 minuten aan een 96-well GF/B-filterplaat toegevoegd om het filter voor te bevochtigen en vervolgens verwijderd. De volgende reagentia worden vervolgens toegevoegd: 20 μL assaybuffer, 10 μL seriële verdunningen van deze verbinding, 20 μL ³H-Smo-antagonist (3 nM eindconcentratie) en 50 μL membraanbereiding (40 μg totaal eiwit). De platen worden gedurende 2 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd, vervolgens gewassen en vacuümgedroogd. De platen worden vervolgens 1 uur gedroogd in een oven van 60°C voordat 45 μL Microscint 20 wordt toegevoegd en gedurende 30 minuten tot 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd, waarna ze worden geteld in een TopCount scintillatieteller. De gegevens worden geanalyseerd met behulp van GraphPad Prism-software.
In vivo	PF-5274857 vertoont significante dosisafhankelijke tumorgroeiremming (TGI) en induceert tumorregressie bij hoge doses (>10 mg/kg). Deze verbinding reguleert de genexpressieniveaus van Gli1, Gli2, Ptch1 en Ptch2 in verschillende mate met maximale effecten die worden bereikt tussen 6 en 12 uur na toediening (Gli1 is het meest gevoelige gen), terwijl het weinig effect heeft op de Smo-niveaus. In huidweefsel wordt ook neerwaartse regulatie van Gli1 en Gli2 waargenomen met een vergelijkbaar tijdsverloop door deze chemische stof. De modelafgeleide geneesmiddelconcentratie voor halfmaximale remming van de tumor-Gli1-mRNA-productiesnelheid (IC50) door deze verbinding wordt bepaald op 8,9 nM in de Ptch^+/−p53^+/− medulloblastoom-allotransplantaatmuizen, wat wiskundig overeenkomt met tumorregressie van 119% TGI na 6 dagen plasma-expositie bij deze concentratie. In de Ptch^+/−p53^−/− medulloblastoom-allotransplantaatmuizen wordt de IC50-waarde geschat op 3,5 nM, consistent met de Ptch^+/−p53^+/− resultaten. Het is ook in staat om de bloed-hersenbarrière bij ratten binnen 4 uur na toediening te passeren.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22084163/

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PF-5274857 Hedgehog/Smoothened antagonist

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 436.96