uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

GSK2606414 PERK remmer

Name: GSK2606414
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7307
Rating: 5 (96 reviews)

Cat.Nr.S7307

GSK2606414 is een oraal beschikbare, potente en selectieve PERK-remmer met een IC50 van 0,4 nM, die een minstens 100-voudige selectiviteit vertoont ten opzichte van de andere geteste EIF2AK's. Deze verbinding vermindert GANT-61-geïnduceerde autophagy in NB-cellen met MYCN-amplificatie. Het verergert ER stress-induced apoptosis in HCT116-cellen, terwijl het de apoptosis in SIL1 KD HeLa-cellen vermindert.

GSK2606414 PERK remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 451.44

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.92%

99.92

Gerelateerde doelwitten	Bcl-2 Caspase PD-1/PD-L1 Ferroptosis p53 Apoptosis related Synthetic Lethality STAT TNF-alpha Ras
Overige PERK Inhibitoren	GSK2656157 Salubrinal ISRIB (trans-isomer) Azoramide Sal003 BTdCPU CCT020312 MK-28 AMG PERK 44

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
L929	Anti-neprotic assay			Anti-neprotic activity in mouse L929 cells assessed as reduction in TNF-induced necroptosis and measured every 1 hr by SYTOX Green dye based fluorescence assay, IC50=0.0004μM.	31622096
MEF	Anti-neprotic assay			Anti-neprotic activity in mouse MEF cells assessed as reduction in TNF-induced necroptosis and measured every 1 hr in presence of z-VAD by SYTOX Green dye based fluorescence assay, IC50=0.0073μM.	31622096
A549	Function assay		2 hrs	Inhibition of thapsigargin-induced autophosphorylation of PERK in human A549 cells after 2 hrs by Western blotting, IC50<0.03μM.	22827572
A549	Function assay		1 hr	Inhibition of thapsigargin-induced autophosphorylation of PERK in human A549 cells preincubated for 1 hr followed by thapsigargin-induction measured after 1 hr by Western blotting analysis, IC50<0.03μM.	24900593
A549	Function assay	0.03 uM	2 hrs	Inhibition of thapsigargin-induced autophosphorylation of PERK in human A549 cells at 0.03 uM after 2 hrs by Western blotting	22827572
Caco-2	Function assay		48 hours	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of Caco-2 cells after 48 hours by high content imaging, IC50=0.25μM.	ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	451.44	Formule	C₂₄H₂₀F₃N₅O	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1337531-36-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CN1C=C(C2=C(N=CN=C21)N)C3=CC4=C(C=C3)N(CC4)C(=O)CC5=CC(=CC=C5)C(F)(F)F

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 90 mg/mL (199.36 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 19 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	4.500mg/ml (9.97mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 90 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5% DMSO 1 45% PEG 300 2 ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	1.000mg/ml (2.22mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 450 μL PEG 300, mix evenly to clarify it; then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	10.000mg/ml (22.15mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 200 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	0.900mg/ml (1.99mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 18 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	The first PERK-selective inhibitor with good oral bioavailability and crosses the blood-brain barrier.
Targets/IC₅₀/Ki	EIF2AK3 (PERK) (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	Deze verbinding remt PERK-autofosforylering in A459-cellen met een IC50 van <0,3 μM.
Kinase Assay	PKR-achtige Endoplasmatisch Reticulum Kinase (PERK) Assay (HTRF-formaat)
Kinase Assay	GST-PERK cytoplasmatisch domein wordt aangekocht. 6-His-full-length menselijk eIF2α wordt gezuiverd uit baculovirusexpressie in Sf9-insectencellen. Het eIF2α-eiwit wordt door dialyse uitgewisseld naar PBS, chemisch gemodificeerd door NHS-LC-biotine en vervolgens door dialyse uitgewisseld naar 50 mM Tris, pH 7,2, 250 mM NaCl, 5 mM DTT. Eiwit wordt gealiquoteerd en opgeslagen bij -80 °C. Quenchoplossing wordt vers bereid en geeft, wanneer toegevoegd aan de reactie, eindconcentraties van 4 nM eIF2α phospho-ser51-antilichaam, 4 nM Eu-1024 gelabeld anti-konijn IgG, 40 nM streptavidine Surelight APC en 15 mM EDTA. Reacties werden uitgevoerd in zwarte 384-well polystyreen platen met laag volume in een eindvolume van 10 μL. Het reactievolume bevat, in eindconcentraties, 10 mM HEPES, 5 mM MgCl₂, 5 μM ATP, 1 mM DTT, 2 mM CHAPS, 40 nM gebiotinyleerd 6-His-eIF2α en 0,4 nM GST-PERK. Te analyseren verbindingen worden opgelost in DMSO tot 1,0 mM en serieel verdund 1–3 met DMSO over 11 verdunningen. Een hoeveelheid van 0,1 μL van elke concentratie wordt overgebracht naar de corresponderende put van een assayplaat. Dit creëert een eindconcentratiebereik van de verbinding van 0,00017 tot 10 μM. GST-PERK-oplossing wordt toegevoegd aan assayplaten die verbindingen bevatten en 30 minuten bij kamertemperatuur voorgeïncubeerd. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van ATP- en eIF2α-substraatoplossing. Na 1 uur incubatie wordt de quenchoplossing toegevoegd. De platen worden 2 uur bij kamertemperatuur afgedekt voordat het signaal wordt bepaald. Het resulterende signaal wordt gekwantificeerd op een Viewlux-lezer. Het APC-signaal wordt genormaliseerd naar het europiumsignaal door de gegevens te transformeren via een APC/Eu-berekening. De gegevens voor concentratie-responsiecurven worden uitgezet als %-inhibitie berekend met de data reductieformule 100 × [1 – (U1 – C2)/(C1 – C2)] versus concentratie van de verbinding, waarbij U de onbekende waarde is, C1 de gemiddelde controlewaarde verkregen voor 1% DMSO en C2 de gemiddelde controlewaarde verkregen voor 0,1 M EDTA. Gegevens worden gefit met een curve beschreven door waarbij A de minimale respons is, B de maximale respons, D de hellingsfactor, x de concentratie van de verbinding en C de IC50. De resultaten voor elke verbinding worden geregistreerd als IC50-waarden.
In vivo	GSK2606414 vertoont een hoge orale beschikbaarheid en een lage tot matige bloedklaring bij muizen, ratten en honden. Deze verbinding, oraal toegediend, remt de tumorgroei op een dosisafhankelijke manier bij muizen met pancreas humane BxPC3-tumoren.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22827572/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-PERK / PERK p-KIT / KIT / p-STAT5 / p-ERK		28332979

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):