uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

NVP-AEW541 IGF-1R remmer

Name: NVP-AEW541
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1034
Rating: 5 (65 reviews)

Cat.Nr.S1034

NVP-AEW541 is een potente remmer van IGF-1R/InsR met een IC50 van 150 nM/140 nM in celvrije assays, met een grotere potentie en selectiviteit voor IGF-1R in een celgebaseerde assay.

NVP-AEW541 IGF-1R remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 439.55

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.61%

99.61

Gerelateerde doelwitten	EGFR VEGFR PDGFR FGFR c-Met Src MEK CSF-1R FLT3 HER2
Overige IGF-1R Inhibitoren	Linsitinib (OSI-906) BMS-536924 BMS-754807 Picropodophyllin (AXL1717) GSK1904529A AG-1024 NVP-ADW742 NT157 PQ 401 MSDC-0160

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
NWT-21	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits IGF-IR with IC50 of 0.086 ± 0.028 μM	15050915
A14	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits InsR with IC50 of 2.3 ± 0.163 μM	15050915
A431	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits HER1 with IC50 of >10 μM	15050915
A31	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits PDGFR with IC50 of >10 μM	15050915
GIST882	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits c-Kit with IC50 of >5 μM	15050915
32D-Bcr-Abl	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits Bcr-Abl p210 with IC50 of >10 μM	15050915
MCF-7	Cytoxicity assay			DMSO	IC50=1.64 μM	15050915
NWT-21	Growth inhibitory assay			DMSO	IC50=0.163 μM	15050915
TC-71	Growth inhibitory assay	~1 μM		DMSO	inhibits insulin-like growth factor-I–mediated growth	15867386
TC-71	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
Saos-2	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<3 μM	15867386
U-2OS	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
SK-ES-1	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
SK-N-MC	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
RD-ES	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
SJ-Rh 30	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
SJ-Rh 4	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
6647	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
SARG	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<3 μM	15867386
MOS	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<4 μM	15867386
IOR/OS7	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<1 μM	15867386
IOR/OS9	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<6 μM	15867386
IOR/OS10	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<5 μM	15867386
IOR/OS14	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<4 μM	15867386
LAP35	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
IOR/BRZ	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
IOR/CAR	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<1 μM	15867386
IOR/NGR	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
IOR/RCH	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
RMZ-RC2	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<0.5 μM	15867386
CCA	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<2 μM	15867386
RD/18	Growth inhibitory assay	~7 μM		DMSO	IC50<4 μM	15867386
OVCAR-3	Growth inhibitory assay	~15 μM		DMSO	inhibits cell proliferation	16300820
OVCAR-4	Growth inhibitory assay	~15 μM		DMSO	inhibits cell proliferation	16300820
OVCAR-3	Apoptosis assay	~15 μM		DMSO	induces apoptosis	16300820
OVCAR-4	Apoptosis assay	~15 μM		DMSO	induces apoptosis	16300820
OVCAR-3	Function assay	~15 μM		DMSO	Decreases phosphorylation of AKT	16300820
Huh-7	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=1.4 μM	16530734
Hep-G2	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=1.8 μM	16530734
Hep-3B	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=1.9 μM	16530734
SK-Hep-1	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=6.9 μM	16530734
Huh-7	Function assay	~10 μM		DMSO	Induces cell cycle arrest	16530734
Hep-G2	Function assay	~10 μM		DMSO	Induces cell cycle arrest	16530734
SK-Hep-1	Function assay	~10 μM		DMSO	Induces cell cycle arrest	16530734
BON	Kinase assay	~6 μM		DMSO	induces dephosphorylation of IGF-1R	16601284
BON	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=6.6 μM	16601284
CM	Growth inhibitory assay	~5 μM		DMSO	IC50=3.3 μM	16601284
BON	Function assay	~7.5 μM		DMSO	induces cell cycle arrest	16601284
CM	Function assay	~5 μM		DMSO	induces cell cycle arrest	16601284
BON	Apoptosis assay	~7.5 μM		DMSO	induces Apoptosis	16601284
CM	Apoptosis assay	~5 μM		DMSO	induces Apoptosis	16601284
HT-29	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=1.7 μM	17007015
HCT-116	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	IC50=2.5 μM	17007015
primary colorectal cancer cells	Function assay	~5 μM		DMSO	alters the morphology of the remaining cells	17007015
HTLA-230	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
KCNR	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
SK-N-BE2c	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
SK-N-BE	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
LAN-5	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
GI-CA-N	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
SH-EP	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
SK-N-AS	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
RN-GA	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
SY-5Y(N)	Function assay	~8 μM		DMSO	inhibits IGF-II-mediated stimulation of IGF-IR and Akt	17121898
GI-CA-N	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 6.8 μM	17121898
SH-EP	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 3 μM	17121898
HTLA-230	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 0.5 μM	17121898
SK-N-BE2c	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 1.1 μM	17121898
SK-N-BE2	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 3 μM	17121898
SY-5Y (N)	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 2.4 μM	17121898
LAN-5	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 0.4 μM	17121898
KCNR	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 0.4 μM	17121898
RN-GA	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	IC50= 1.3 μM	17121898
SK-N-AS	Growth inhibitory assay	~8 μM		DMSO	induces apoptosis	17121898
KCNR	Apoptosis assay	~8 μM		DMSO	induces apoptosis	17121898
GI-CA-N	Apoptosis assay	~8 μM		DMSO	induces apoptosis	17121898
HTLA-230	Apoptosis assay	~8 μM		DMSO	induces apoptosis	17121898
SK-N-BE2c	Apoptosis assay	~8 μM		DMSO	induces apoptosis	17121898
SY-5Y (N)	Apoptosis assay	~8 μM		DMSO	induces apoptosis	17121898
HL60AR	Function assay	160 nM			enhances the levels of p27Kip1	17361225
HL60AR	Apoptosis assay	~200 nM			induces apoptosis	17361225
HPAF-II	Kinase assay	~1 μM		DMSO	inhibits IGF-I-mediated signalling	18445520
HPAF-II	Growth inhibitory assay	~2 μM		DMSO	inhibits cell proliferation	18445520
HPAF-II	Function assay	~2 μM		DMSO	inhibits basal and IGF-I-mediated pancreatic cancer cell migration	18445520
TFK-1	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=0.26 μM	20066734
EGI-1	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=0.28 μM	20066734
CC-LP-1	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=0.15 μM	20066734
CC-SW-1	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=0.54 μM	20066734
Sk-ChA-1	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=0.2 μM	20066734
Mz-ChA-1	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=1.39 μM	20066734
Mz-ChA-2	Growth inhibitory assay	~250 nM		DMSO	IC50=0.73 μM	20066734
ECC-1	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits IGF-IR activation by 98%	21295335
Ishikawa	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits IGF-IR activation by 93%	21295335
USPC-1	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits IGF-IR activation by 100%	21295335
USPC-2	Kinase assay	~10 μM		DMSO	inhibits IGF-IR activation by 96%	21295335
ECC-1	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	decreases cell proliferation	21295335
Ishikawa	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	decreases cell proliferation	21295335
USPC-1	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	decreases cell proliferation	21295335
USPC-2	Growth inhibitory assay	~10 μM		DMSO	decreases cell proliferation	21295335
Ba/F3	Function assay				Inhibition of full length IGF-1 receptor (unknown origin) transfected in Ba/F3 cells assessed as cell proliferation, IC50=0.02μM	26951753
HEK293	Function assay		60 mins		Inhibition of full length IGF-1 receptor (unknown origin) autophosphorylation transfected in HEK293 cells pretreated for 60 mins followed by IGF-1 stimulation measured after 10 mins by quantitative Western blot analysis, IC50=0.065μM	26951753
HEK293	Function assay				Displacement of [3H]-dofetilide from human ERG channel expressed in HEK293 cells, IC50=0.13μM	26951753
Ba/F3	Function assay				Inhibition of full length insulin receptor (unknown origin) transfected in Ba/F3 cells assessed as cell proliferation, IC50=0.244μM	26951753
HEK293	Function assay		60 mins		Inhibition of full length insulin receptor (unknown origin) autophosphorylation transfected in HEK293 cells pretreated for 60 mins followed by IGF-1 stimulation measured after 10 mins by quantitative Western blot analysis, IC50=0.892μM	26951753
TC32	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
Saos-2	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
RD	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
Rh41	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells	29435139
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	439.55	Formule	C₂₇H₂₉N₅O	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	475489-16-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	AEW541			Smiles	C1CN(C1)CC2CC(C2)N3C=C(C4=C(N=CN=C43)N)C5=CC(=CC=C5)OCC6=CC=CC=C6

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 88 mg/mL (200.2 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 24 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	20.000mg/ml (45.50mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of clarified PEG400 stock solution of 66.67 mg/ml to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O Dilute to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	Insulin Receptor (Cell-free assay) 0.14 μM IGF-1R (Cell-free assay) 0.15 μM FLT3 (Cell-free assay) 0.42 μM Tek (Cell-free assay) 0.53 μM FLT1 (Cell-free assay) 0.6 μM HER4 (Cell-free assay) 1.4 μM PDGFR (Cell-free assay) 2.0 μM KDR (Cell-free assay) 2.3 μM c-Src (Cell-free assay) 2.4 μM FLT4 (Cell-free assay) 2.4 μM c-Kit (Cell-free assay) 3.3 μM c-Met (Cell-free assay) 3.8 μM HER2 (Cell-free assay) 4.1 μM FGFR1 (Cell-free assay) 4.1 μM PDK-1 (Cell-free assay) 4.8 μM HER1 (Cell-free assay) 5.8 μM
In vitro	NVP-AEW541 remt ook InsR, Tek, Flt1 en Flt3 met een IC50 van respectievelijk 140 nM, 530 nM, 600 nM en 420 nM in gezuiverde kinasen/recombinante kinase domeinen assay. Deze verbinding is selectiever en toont 27-maal potenter dan InsR op cellulair niveau. Het onderdrukt de IGF-I-gemedieerde overleving, zachte agar en proliferatie van MCF-7-cellen met een IC50 van respectievelijk 0,162 μM, 0,105 μM en 1,64 μM. Deze chemische stof vermindert ook het niveau van gefosforyleerde IGF-1R en gefosforyleerde PKB in NWT-21-cellen. Het vertoont een groeiremmend effect op TC-71 musculoskeletale sarcoomcellen in een laag-serummedium en in een medium dat 10% FBS bevat. Deze verbinding remt de celcyclusprogressie en induceert een specifieke G1-arrestatie in sarcoomcellijnen (TC-71, SK-N-MC, SaoS-2, RD/18 en RH4). Het zou de groei van menselijke neuroblastoomcellen kunnen remmen met een IC50 van 0,4-6,8 μM. Een toename van de hypodiploïde fractie en de uitputting van de S- en G2-M-compartimenten konden in deze cellijnen worden gedetecteerd. Deze door de verbinding gestuurde remming van IGF-1R veroorzaakt een vermindering van de fosforylering van Akt, maar niet van Erk1 en Erk2 in neuroblastoomcellen. Het remt de groei van gliomacellen en verstoort de autocriene lus die wordt geïnitieerd door HIF1α-stabilisatie. Een recente studie toont aan dat deze chemische stof de proliferatie en levensvatbaarheid van PC3-, DU145- en 22Rv1-prostaatkankercellen onderdrukt, zonder de noodzaak van geassocieerde celdood. Het verlaagt de phospho-Akt-niveaus in 22Rv1- en DU415-cellen, maar niet in PC3-cellen, zonder de totale Akt-niveaus te beïnvloeden, wat aantoont dat de PTEN-status de effectiviteit van deze verbinding met essentieel Akt kan bepalen. Deze door de verbinding geïnduceerde radiosensibilisatie is afhankelijk van de Akt-activeringsstatus. Het zou de H2AX-fosforylering (een maat voor DSB's) in PC3-, DU145- en 22Rv1-cellen kunnen verhogen.
Kinase Assay	In vitro kinase assays
Kinase Assay	NVP-AEW541 wordt opgelost in DMSO (10 mM) en bewaard bij -20 °C. Verdunningen worden vers gemaakt in DMSO/water 1:1. De uiteindelijke concentratie DMSO in de enzymassays is <0,5 %. De proteïnekinase-assays worden uitgevoerd in 96-well platen bij RT en beëindigd door toevoeging van 20 μL 125 mM EDTA. Vervolgens wordt 30 μL (c-Abl, c-Src, IGF-1R) van het reactiemengsel overgebracht op Immobilon-PVDF dat gedurende 5 min is voorgeweekt met methanol, gespoeld met water, daarna gedurende 5 min geweekt met 0,5 % H₃PO₄ en gemonteerd op een vacuümmanifold. Na het spotten van alle monsters wordt vacuüm aangesloten en elk putje gespoeld met 200 μL 0,5 % H3PO4. Membranen worden verwijderd en 4× gewassen op een schudder met 1,0 % H₃PO₄, eenmaal met ethanol. Na drogen, monteren in een Packard TopCount 96-well frame en toevoegen van 10 μL/well Microscint, worden membranen geteld. IC50-waarden worden berekend door lineaire regressieanalyse van het percentage remming van deze verbinding in duplo, bij vier concentraties (meestal 0,01, 0,1, 1 en 10 μM). Eén eenheid proteïnekinase-activiteit wordt gedefinieerd als 1 nmol ³³P overgedragen van [γ³³P]ATP naar het substraatproteïne per minuut per mg proteïne bij 37 °C.
In vivo	NVP-AEW541 (50 mg/kg, p.o.) resulteert in de opheffing van basale en IGF-I-geïnduceerde receptor-, en PKB- en MAPK-fosforylering, met een T/C-waarde van 14% in het NWT-21 tumoren xenograft. Deze verbinding (50 mg/kg) veroorzaakt tumorreductie in zowel HTLA-230 als SK-N-BE2c xenografts, zonder tekenen van systemische toxiciteit. Het zou tumorinvasie kunnen remmen zowel in Matrigel-gecoate kamers als in HTLA-230 xenografts.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15050915/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15867386/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17121898/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20488164/ [5] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/m/pubmed/21816290/

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):