연구용

Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel

Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel은 Sepharose 4B에 공유 결합된 Protein A 정제된 마우스 IgG2b 단일클론 항체입니다.

Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel

Sellecks 인용됨 101 출판물

제품 비교

설명

Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel은 Sepharose 4B에 공유 결합된 Protein A 정제된 마우스 IgG2b 단일클론 항체입니다.

특성

항체 클론 1E6
항체 동형 마우스 IgG2b
항체 정제 Protein A 정제
결합 항체 젤 1리터당 항체 NLT 7.5g
응용 단백질 정제, 면역침강
제품 구성 본 제품은 10mM Na3PO4, 150mM NaCl, 50% 글리세롤, pH 7.4를 포함하고 0.02% (w/v) 아지드화나트륨이 함유된 스톡 용액에 제조된 50% 젤 현탁액입니다.
권장량 IP: 500 μl 조단백질 용액에 5 μl 젤
결합 용량 충진된 레진 1 ml당 최소 1.1 mg의 DYKDDDDK Tag 융합 단백질 용출
결합 특성 Met-N-말단 DYKDDDDK Tag 융합 단백질: Met-DYKDDDDK Tag–단백질
N-말단 DYKDDDDK Tag 융합 단백질: DYKDDDDK Tag–단백질
C-말단 DYKDDDDK Tag 융합 단백질: 단백질-DYKDDDDK Tag

보관 (수령일로부터)

개봉하지 않은 제품은 -20°C에서 2년간 안정합니다. 사용 후, 레진은 세척하고 10mM 인산나트륨, 150mM 염화나트륨, pH 7.4, 0.02% 아지드화나트륨을 함유한 50% 글리세롤에 보관하여 제품을 보호해야 합니다. 글리세롤이 없는 상태에서는 얼리지 마십시오.

프로토콜

이 샘플 프로토콜은 DYKDDDDK-태그(DYKDDDDK-tagged) 단백질의 면역침강을 위해 권장됩니다.

친화성 젤 준비

1. 균일한 레진 현탁액을 위해 바이알에 있는 Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel을 철저히 현탁시킵니다. 젤 현탁액 10 μl (약 5 μl의 충진된 젤 부피)를 새 튜브로 신속하게 옮깁니다.

2. 0.5 mL TBS를 추가합니다. 피펫팅으로 Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel을 철저히 현탁시킵니다. 5000 rpm에서 30초 동안 레진을 원심분리하고 상층액을 조심스럽게 제거합니다. 레진을 버리지 않고 모든 세척 버퍼를 제거했는지 확인하십시오. 3-4회 반복합니다.

3. 세척된 레진에 세포 주변형질 추출물 500 μl를 추가합니다.

4. 샘플을 4°C에서 2시간 동안 부드럽게 흔들어줍니다.

5. 5000 rpm에서 30초 동안 레진을 원심분리합니다. 상층액을 새 튜브로 옮깁니다.

6. 상층액의 OD280이 < 0.05가 될 때까지 0.5 ml TBS로 레진을 세척합니다.

7. DYKDDDDK-태그된 단백질을 용출하기 위해 극단적인 pH 조건 또는 과량의 폴리 DYKDDDDK Tag 펩타이드를 레진에 적용할 수 있습니다. 표적 단백질의 특성 및 하위 응용 프로그램에 따라 용출 방법을 선택하십시오.

8. 표적 단백질의 직접 검출을 위해 2x SDS-PAGE 샘플 로딩 버퍼를 20 μl 젤 현탁액에 1:1 비율로 첨가합니다. 샘플을 5분간 끓입니다. 5000 rpm에서 30초 동안 원심분리합니다. SDS-PAGE를 위해 상층액을 새 바이알로 조심스럽게 옮깁s니다.

샘플 결합
레진 세척
용출 및 검출

Selleck 제공 Poly DYKDDDDK Tag Peptide lyophilized powder 단백질 제품 용출을 위해.

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기술 지원

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