Poly DYKDDDDK Tag Peptide lyophilized powder

제품 비교

설명

Poly DYKDDDDK Tag Peptide 동결건조 분말(3X DYKDDDDK Tag Peptide)은 분자량 2864 Da의 23개 아미노산으로 구성된 폴리펩타이드로, 경쟁을 통해 Anti-DYKDDDDK Tag 항체에 결합할 수 있어, 면역침강 DYKDDDDK Tag 융합 발현 단백질 중에 Anti-DYKDDDDK Tag 항체에 결합된 항체를 용출할 수 있습니다. 폴리펩타이드 내 Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp 모티프는 세 번 반복되며, 탄소 말단의 8개 아미노산은 고전적인 DYKDDDDK Tag (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)를 구성합니다.

특성

응용

용액 또는 Anti-DYKDDDDK 비드에 아가로스와 결합된 ANTI-DYKDDDDK Tag 단일클론 항체로부터 DYKDDDDK 융합 단백질의 경쟁적 용출에 사용합니다.

주의사항

1. 처음 사용하기 전에 사용자 설명서를 주의 깊게 읽으십시오.

2. 비드 사용 및 보관 중 동결, 건조 및 고속 원심분리를 피하십시오.

3. 본 제품은 R&D 용으로만 사용되며, 의약품, 가정용 또는 기타 용도로는 사용할 수 없습니다. 위험 및 안전 취급 관행에 대한 정보는 물질안전보건자료를 참조하십시오.

절차

Anti-DYKDDDDK 비드로부터 DYKDDDDK 융합 단백질의 펩타이드 용출

1. Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel을 바이알에서 완전히 현탁하여 레진의 균일한 현탁액을 만듭니다. 겔 현탁액 10 μl (약 5 μl의 충전된 겔 부피)를 새 튜브로 빠르게 옮깁니다.

2. 0.6 mL TBS를 첨가합니다. 피펫팅하여 Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel을 완전히 현탁합니다. 레진을 5000 rpm에서 30초 동안 원심분리하고 상층액을 조심스럽게 제거합니다. 레진을 버리지 않고 모든 세척 버퍼를 제거하십시오. 3-4회 반복합니다.

3. 세척된 레진에 500 μL의 세포 주변질 추출물을 첨가합니다.

4. 샘플을 4°C에서 2시간 동안 부드럽게 교반합니다.

5. 레진을 5000 rpm에서 30초 동안 원심분리합니다. 상층액을 새 튜브로 옮깁니다.

6. 상층액의 OD280이 <0.05가 될 때까지 레진을 0.5 mL TBS로 세척합니다.

7. Poly DYKDDDDK Peptide와의 경쟁에 의한 DYKDDDDK 융합 단백질의 용출. 200-400 ug/mL Poly DYKDDDDK Peptide를 포함하는 TBS 용액 5회 칼럼 부피 분취량으로 경쟁적 용출을 통해 결합된 DYKDDDDK 융합 단백질을 용출합니다.

8. Anti-DYKDDDDK 비드 재활용
Poly DYKDDDDK Peptide는 Anti-DYKDDDDK 비드에 결합된 모든 DYKDDDDK 융합 단백질을 용출하지 못할 수 있습니다. 사용 직후 0.1 M 글리신 HCl, pH 3.5 용액 5 mL 분취량 3회로 세척하여 Anti-DYKDDDDK 비드를 재생하는 것이 좋습니다. 유출액이 중성 pH가 될 때까지 겔은 TBS에서 즉시 재평형되어야 합니다.

참고: Anti-DYKDDDDK 비드를 글리신 HCl에 20분 이상 두지 마십시오.
9. Anti-DYKDDDDK 비드 보관 Anti-DYKDDDDK 비드를 5 mL의 50% 글리세롤 (10 mM 인산나트륨, 150 mM 염화나트륨, pH 7.4, 0.02% (w/v) 아지드화나트륨 함유)로 3회 세척합니다. 그런 다음 5 mL의 50% 글리세롤 (10 mM 인산나트륨, 150 mM 염화나트륨, pH 7.4, 0.02% (w/v) 아지드화나트륨 함유)을 추가하고 배액하지 않고 -20°C에서 보관합니다.

보관 (수령일로부터)

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