Home Immunology & Inflammation SPHK 억제제 Opaganib (ABC294640)

연구용

Opaganib (ABC294640) SphK2 억제제

제품 번호: S7174

Opaganib (ABC294640)은 경구 생체 이용이 가능하며 약 60 μM의 IC50을 갖는 선택적 sphingosine kinase-2 (SphK2) 억제제입니다. 임상 1/2상.
Opaganib (ABC294640) SPHK 억제제 Chemical Structure

화학 구조

분자량: 380.91

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품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.73%
99.73

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant SphK2 expressed in Sf9 cells assessed as radiolabeled products using 10 uM sphingosine and 10 uM gamma[32P]ATP by liquid scintillation counting, Ki=9.8μM 25643074
Sf9 Function assay 2 hrs Inhibition of recombinant human full-length N-terminal His-tagged SK2 expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells using NBD-Sph as substrate measured after 2 hrs by fluorescence based HPLC analysis, Ki=9.8μM 30889352
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 380.91 화학식

C23H25ClN2O

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 915385-81-8 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles C1C2CC3(CC1CC(C2)(C3)C(=O)NCC4=CC=NC=C4)C5=CC=C(C=C5)Cl

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 76 mg/mL (199.52 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 28 mg/mL

Water : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
SphK2
(Cell-free assay)
60 μM
시험관 내(In vitro)
Opaganib (ABC294640) markedly alters the ratio of ceramide/S1P consistent with inhibition of SK activity in MDA-MB-231 cells. It inhibits tumor cell proliferation with IC50 values ranging from approximately 6 to 48 μM, and impairs tumor cell migration concomitant with loss of microfilaments. This compound induces nonapoptotic cell death, morphological changes in lysosomes, formation of autophagosomes, and increases in acidic vesicles in A-498, PC-3, and MDA-MB-231 cells. In both MCF-7 and ER-transfected HEK293 cells, it decreases E2-stimulated ERE-luciferase activity.
키나아제 분석
Sphingosine Kinase 분석
Opaganib (ABC294640) 및 DMS의 IC50 값은 새로 개발된 HPLC 기반 SK 활성 분석법으로 결정됩니다. 간략히 설명하면, 시험 화합물을 1 mg/ml 지방산 무함유 소 혈청 알부민, 100 μM ATP 및 400 μM MgCl2가 포함된 아래에 상세히 기술된 동종효소 선택적 분석 완충액에서 재조합 SK1 또는 SK2 및 NBD-Sph와 함께 배양합니다. 생성물인 NBD-S1P는 다음과 같이 HPLC를 통해 NBD-Sph로부터 분리됩니다: Waters 2495 형광 검출기가 장착된 Waters 2795 HPLC 시스템, C8 Chromolith RP-8e 칼럼(100 × 4.6 mm), 1 ml/min 이동상(아세토니트릴/20 mM 인산나트륨 완충액, pH 2.5, 45:55). 형광은 여기 파장 465 nm 및 방출 파장 531 nm에서 모니터링됩니다. NBD-S1P/(NBD-Sph + NBD-S1P) 비율은 SK 활성 척도로 사용됩니다. 각 SK 동종효소 선택적 분석 완충액은 20 mM Tris, pH 7.4, 5 mM EDTA, 5 mM EGTA, 3 mM β-머캅토에탄올, 5% 글리세롤, 1× 프로테아제 억제제 및 1× 포스파타제 억제제를 포함했습니다. SK1 분석 완충액에는 0.25%(최종 농도) Triton X-100이 첨가되고, SK2 완충액에는 1 M(최종 농도) KCl이 첨가됩니다. 분석은 실온에서 2시간 동안 수행되며, 이후 1.5 부피의 메탄올을 첨가하여 키나아제 반응을 종결시킵니다. 10분 후, 샘플을 20,000g에서 원심분리하여 침전된 단백질을 펠릿화하고 상층액을 HPLC로 분석합니다. 본 화합물에 의한 SK2 억제의 Ki를 결정하는 실험에서는 ADP Quest 분석 시스템을 사용하여 다양한 농도의 스핑고신(sphingosine) 존재 하에서 키나아제 활성을 측정합니다. 세포 SK 활성에 대한 Opaganib의 영향을 결정하기 위해, 거의 융합된(near-confluent) MDA-MB-231 세포를 밤새 혈청 기아 상태로 만든 다음 다양한 농도의 Opaganib로 처리합니다. 그 후 세포를 1 μM 최종 농도의 [3H]스핑고신과 함께 배양합니다. 세포는 외부 스핑고신을 흡수하고, 이는 SK 활성을 통해 S1P로 전환되며, [3H]S1P는 추출을 통해 [3H]스핑고신으로부터 분리되고 신틸레이션 계수법으로 정량화됩니다.
생체 내(In vivo)
Opaganib (ABC294640) significantly reduces tumor growth in mice bearing mammary adenocarcinoma xenografts, associated with depletion of S1P levels. In severe combined immunodeficient mice bearing A-498 xenografts, it delays tumor growth and elevates autophagy markers. This compound also protects against liver transplantation-induced inflammation and cross-talk between innate and adaptive immunities, major events precipitating and exacerbating graft injury, and improves liver function and survival.
참조
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22848628/

적용 분야 (Applications)

방법 바이오마커 이미지 PMID
Western blot c-Myc pRb / Rb H3K9ac / p21 p-STAT3 / STAT3
S7174-WB1
27517489
Growth inhibition assay Cell proliferation
S7174-viability1
25122609

임상시험 정보 (Clinical Trial Information)

(데이터 출처 https://clinicaltrials.gov, 업데이트 날짜 2024-05-22)

NCT 번호 모집 조건 스폰서/협력자 시작일 단계
NCT02939807 Withdrawn
Carcinoma Hepatocellular
Medical University of South Carolina|National Cancer Institute (NCI)|Apogee Biotechnology Corporation
 September 30 2019 Phase 2
NCT03377179 Completed
Cholangiocarcinoma|Cholangiocarcinoma Non-resectable|Cholangiocarcinoma Perihilar|Cholangiocarcinoma Extrahepatic|Cholangiocarcinoma Intrahepatic
RedHill Biopharma Limited
 March 7 2018 Phase 2
NCT02757326 Terminated
Multiple Myeloma
RedHill Biopharma Limited|Apogee Biotechnology Corporation|Duke University|National Cancer Institute (NCI)
 December 13 2016 Phase 1|Phase 2
NCT02229981 Withdrawn
Diffuse Large B Cell Lymphoma|Kaposi Sarcoma
RedHill Biopharma Limited|Louisiana State University Health Sciences Center in New Orleans|Apogee Biotechnology Corporation
 July 2014 Phase 1|Phase 2
NCT01488513 Completed
Pancreatic Cancer|Unspecified Adult Solid Tumor Protocol Specific
RedHill Biopharma Limited|Apogee Biotechnology Corporation|Medical University of South Carolina|FDA Office of Orphan Products Development|National Cancer Institute (NCI)
 August 2011 Phase 1