Home PI3K/Akt/mTOR PDK inhibitor BX-912

연구용

BX-912 PDK inhibitor

제품 번호: S1275

BX912 is a potent and specific PDK1 inhibitor with IC50 of 12 nM, 9- and 105- fold greater selectivity for PDK1 than PKA and PKC in cell-free assays, respectively. In comparison to GSK3β, selectivity for PDK1 is 600-fold.
BX-912 PDK inhibitor Chemical Structure

화학 구조

분자량: 471.35

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품질 관리 (Quality Control)

배치: S127501 DMSO]94 mg/mL]false]Ethanol]94 mg/mL]false]Water]Insoluble]false 순도: 99.80%
99.80

화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 471.35 화학식

C20H23BrN8O

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 702674-56-4 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles C1CCN(C1)C(=O)NC2=CC=CC(=C2)NC3=NC=C(C(=N3)NCCC4=CN=CN4)Br

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 94 mg/mL (199.42 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 94 mg/mL

Water : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PDK-1
(Cell-free assay)
12 nM
PKA
(Cell-free assay)
110 nM
KDR
(Cell-free assay)
410 nM
CDK2/CyclinE
(Cell-free assay)
650 nM
Chk1
(Cell-free assay)
830 nM
c-Kit
(Cell-free assay)
850 nM
시험관 내(In vitro)
BX912는 각각 0.83, 0.11, 0.85 및 0.41 μM의 IC50으로 ChcK1, PKA, c-kit 및 KDR을 예방합니다. BX912는 종양 세포의 PDK1/Akt 신호 전달을 차단하고 배양 중인 다양한 종양 세포주(예: PC-3 세포)의 부착 의존적 성장을 억제하거나 세포 사멸을 유도합니다. Akt 활성이 높은 다수의 암 세포주(예: MDA-468 유방암)는 조직 배양 플라스틱보다 연질 아가에서 PDK1 억제제 BX912에 의한 성장 억제에 30배 이상 더 민감하며, 이는 부착되지 않은 세포에 특히 중요한 PDK1/Akt 신호 전달 경로의 세포 생존 기능과 일치합니다. BX912는 직접적인 키나아제 분석 형식에서 PDK1 효소 활성을 강력하게 차단하지만, BX912는 미리 활성화된 AKT2 활성(IC50 > 10 μM)을 차단하지 못합니다. 따라서 BX-912는 PDK1의 직접적인 억제제입니다. BX912는 기질인 ATP와 관련하여 PDK1 활성의 경쟁적 억제제이며, 이는 BX912가 PDK1의 ATP 결합 포켓에 결합함을 시사합니다. BX912의 아미노피리미딘 골격은 PDK1의 활성 부위에서 유사한 방향을 취합니다. BX912는 4 N DNA 함량을 가진 MDA-468 세포 집단의 뚜렷한 증가를 촉진하여 세포 주기의 G2/M 단계에서의 차단을 나타냅니다. BX912는 또한 연질 아가에서 HCT-116 세포의 성장을 강력하게 억제하여 1 μM 용량에서 96%의 억제 효과를 보입니다. BX912는 연질 아가에서 PC-3 세포의 성장을 강력하게 억제하여 0.32 μM의 IC50을 나타냅니다.
키나아제 분석
키나아제 분석
PDK1은 직접적인 키나아제 분석법과 PDK1 및 PtdIns-3,4-P2 매개 AKT2 활성화를 측정하는 결합 분석 형식으로 분석됩니다. 결합 분석을 위해 최종 분석 혼합물(60 μL)에는 15 mM MOPS(pH 7.2), 1 mg/mL 소 혈청 알부민, 18 mM β-글리세롤 포스페이트, 0.7 mM 디티오트레이톨, 3 mM EGTA, 10 mM MgOAc, 7.5 μM ATP, 0.2 μCi [γ- 33P]ATP, 7.5 μM 비오틴화 펩타이드 기질(biotin-ARRRDGGGAQPFRPRAATF), 0.5 μL PtdIns-3,4-P2 함유 인지질 소포, 60 pg의 정제된 재조합 인간 PDK1, 172 ng의 정제된 재조합 인간 AKT2가 포함되었습니다. 실온에서 2시간 동안 배양한 후, 비오틴 표지 펩타이드를 분석 혼합물 10 μL에서 스트렙타비딘 코팅 SPA 비드에 포획하고, Wallac MicroBeta 카운터에서 섬광 근접법으로 생성물 형성을 측정합니다. 생성된 산물은 배양 시간 및 첨가된 PDK1과 비활성 AKT2의 양에 비례합니다. PDK1은 분석법이 AKT2 활성화 억제제와 PDK1 또는 AKT2의 직접 억제제인 BX-912를 민감하게 검출할 수 있도록 차적정 수준으로 첨가됩니다. PDK1 활성을 직접 측정하기 위해, 최종 분석 혼합물(60 μL)에는 50 mM Tris-HCl(pH 7.5), 0.1 mM EGTA, 0.1 mM EDTA, 0.1% β-머캅토에탄올, 1 mg/mL 소 혈청 알부민, 10 mM MgOAc, 10 μM ATP, 0.2 μCi [γ-33P]ATP, 7.5 μM 기질 펩타이드(H2N-ARRRGVTTKTFCGT), 60 ng의 정제된 재조합 인간 PDK1이 포함되었습니다. 실온에서 4시간 후, 25 mM EDTA를 첨가하고 반응 혼합물의 일부를 P81 포스포셀룰로오스 종이에 점적합니다. 여과지는 0.75% 인산으로 3회, 아세톤으로 1회 세척합니다. 건조 후 필터 결합 표지 펩타이드는 포스포이미저를 사용하여 정량합니다.
참조