연구용
PNU-120596 AChR 조절자
제품 번호S2629
화학 구조
분자량: 311.72
품질 관리
화학 정보, 보관 및 안정성
| 분자량 | 311.72 | 화학식 | C13H14ClN3O4 |
보관 (수령일로부터) | |
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| CAS 번호 | 501925-31-1 | SDF 다운로드 | 원액 보관 |
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| 동의어 | Nsc 216666 | Smiles | CC1=CC(=NO1)NC(=O)NC2=CC(=C(C=C2OC)OC)Cl | ||
용해도
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In vitro |
DMSO
: 62 mg/mL
(198.89 mM)
Ethanol : 1 mg/mL Water : Insoluble |
몰농도 계산기
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In vivo |
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생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)
1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)
2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)
계산 결과:
작업 농도: mg/ml;
DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )
생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.
생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.
참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.
작용 메커니즘
| Targets/IC50/Ki |
α7 nAChR
216 nM(EC50)
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| 시험관 내(In vitro) |
PNU-120596은 조작된 인간 α7 nAChR 변이에 의해 매개되는 작용제(Ach) 유발 칼슘 유입을 증가시킵니다. 이 화합물은 야생형 수용체에 의해 매개되는 작용제(콜린 및 Ach) 유발 전류를 증가시키며, Xenopus 난모세포에서 작용제가 지속적으로 존재하는 경우 유발 반응의 현저한 연장을 보여줍니다. 이는 α7 nAChRs의 채널 평균 개방 시간을 증가시키지만 이온 선택성에는 영향을 미치지 않으며, 단위 전도도에는 거의 영향을 미치지 않습니다. 급성 해마 슬라이스에 적용했을 때, 이 화학 물질은 피라미드 뉴런에서 측정된 Ach 유발 GABA성 시냅스 후 전류의 빈도를 증가시킵니다. 이 효과는 TTX에 의해 억제되는데, 이는 해마 개재뉴런의 몸체수상돌기 막에 위치한 α7 nAChRs의 기능을 조절함을 시사합니다. α7 nAChR에 대한 양성 조절 외에도, 이 화합물은 탈감작 역학의 심오한 지연을 유도하여 α7 nAChR의 과도한 자극을 통한 Ca2+ 유도 독성의 가능성을 높입니다. α7 nAChR에 결합하는 동안 내부 베타 시트, 전이 영역 및 작용제 결합 부위에서 시스테인 접근성에 변화를 일으킵니다. 이 화학 물질의 결합 부위는 작용제 결합 부위에 있지 않으며, Ach에 의해 촉진되는 게이팅 형태와 유사하지만 동일하지 않은 형태 변화 효과를 유발함으로써 니코틴 수용체의 작용제 유발 게이팅을 향상시킵니다.
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| 키나아제 분석 |
Ca2+ 형광 분석
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α7 nAChR 변이체(α7*)를 발현하는 SH-EP1 인간 상피 세포는 비필수 아미노산을 함유하는 최소 필수 배지(MEM)에서 10% 소 태아 혈청, L-글루타민, 100 U/ml 페니실린/스트렙토마이신, 250 ng/mL 펀지존, 400 μg/mL 하이그로마이신 B 및 800 μg/mL 제네티신을 보충하여 배양됩니다. α7*은 인간 α7 nAChR의 변이체이며, 첫 번째 막관통 도메인에 두 개의 점 돌연변이(T230P 및 C241S)를 가지고 있어 SH-EP1 세포에서 높은 기능적 발현을 가능하게 합니다 [Groppi VE, Wolfe ML, Berkenpas MB (2003) U.S. Patent 6,693,172 B1]. 세포는 37 °C, 6% CO2 배양기에서 배양됩니다. 세포는 분석 2일 전에 트립신 처리되어 어두운 측벽과 투명한 바닥이 있는 96웰 플레이트에 2 × 104 세포/웰의 밀도로 플레이팅됩니다. 세포는 무수 디메틸설폭사이드에 Calcium Green-1 AM과 20% 플루로닉 F-127 혼합물로 로딩됩니다. 이 시약은 각 웰의 성장 배지에 직접 첨가되어 2 μM Calcium Green-1 AM의 최종 농도를 얻습니다. 세포는 염료에서 37 °C에서 1시간 동안 배양된 후 Mark의 변형 Earle의 균형 염 용액(MMEBSS)으로 4회 세척됩니다. MMEBSS는 다음(mM)으로 구성됩니다: 4 CaCl2, 0.8 MgSO4, 20 NaCl, 5.3 KCl, 5.6 D-글루코스, 20 Tris-HEPES, 및 120 N-메틸-D-글루카민, pH 7.4. 네 번째 세척 후, 세포는 37 °C에서 최소 10분 동안 배양됩니다. 각 웰의 MMEBSS 최종 부피는 100 μL이며 아트로핀은 모든 웰에 1 μM의 최종 농도로 첨가됩니다. 형광 이미징 플레이트 리더(FLIPR; Molecular Devices, Union City, CA)는 500 mW의 전력을 사용하여 488 nm에서 Calcium Green을 여기시키고 >525 nm의 형광 방출을 읽도록 설정됩니다. 각 웰을 조명하기 위해 0.5초 노출이 사용됩니다. 형광은 F-스톱이 2.0 또는 1.2로 설정된 상태에서 감지됩니다. 30초의 기준선 기록 후, 시험 화합물은 96웰 플레이트의 각 웰에 50 μL의 3 × 스톡 용액으로 첨가됩니다. 각 실험에서 4개의 웰은 차량(0.2% DMSO) 대조군으로 사용됩니다.
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| 생체 내(In vivo) |
PNU-120596 (1 mg/kg)을 쥐에게 전신 투여하면 조현병과 관련된 회로 수준 교란을 반영하는 것으로 제안된 모델인 암페타민으로 인한 청각 게이팅 결함을 개선합니다. 카라기난 전에 투여했을 때, 이 화합물 30 mg/kg은 기계적 통각과민 및 체중 부하 결함을 최대 4시간 동안 유의하게 완화시킵니다. 이 화학 물질은 뒷발 부종 내 TNF-α 및 IL-6 수준의 카라기난 유발 증가를 완화시켰으며, 디클로페낙은 IL-6 수준만 완화시켰습니다. 카라기난 또는 CFA에 의해 유발된 확립된 기계적 통각과민도 이 약물에 의해 부분적으로 역전됩니다.
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참조 |
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기술 지원
제품은 연구용으로만 사용됩니다. 인체에는 사용하지 마십시오. 환자에게 판매하지 않습니다.
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