연구용

KU-0063794 mTOR 억제제

Name: KU-0063794
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1226
Rating: 5 (77 reviews)

제품 번호S1226

KU-0063794는 무세포 분석에서 IC50이 ~10 nM인 mTORC1 및 mTORC2의 강력하고 고도로 특이적인 이중 mTOR 억제제입니다. PI3K에는 영향을 미치지 않습니다.

화학 구조

분자량: 465.54

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품질 관리

배치: 순도: 99.91%

99.91

관련 타겟	PI3K Akt GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
기타 mTOR 억제제	Torin 1 Torin 2 AZD8055 Ridaforolimus (Deforolimus, MK-8669) Sapanisertib (MLN0128, INK-128) Torkinib (PP242) MHY1485 Vistusertib (AZD2014) OSI-027 WYE-354

세포 배양, 처리 및 작업 농도

세포주	분석 유형	농도	배양 시간	제형	활성 설명	PMID
HepG2	Cell Viability Assay	0.1–50 μM	72 h		decreases cell viability in a dose dependent manner	26278819
HepG2	Colony Formation Assay	1–50 μM	10 d		decreases the number of viable HepG2 colonies significantly	26278819
HepG2	Apoptosis Assay	0.1–50 μM	48 h		induces apoptosis in a dose dependent manner	26278819
HepG2	Function Assay	5/10 μM	24 h		dramatically inhibits phosphorylation of AKT at Ser-473	26278819
HepG2	Function Assay	5/10 μM	24 h		downregulates the levels HIF1α and cyclin D1	26278819
HepG2	Function Assay	0.1–50 μM	24 h		induces p62 downregulation, Beclin-1 expression and LC3B-I to LC3B-II conversion in a dose dependent manner	26278819
HepG3	Function Assay	0.1–50 μM	48 h		induces cell autophagy in a dose dependent manner	26278819
AGS	Growth Inhibition Assay				IC50=15.0 ± 2.91 μM	24597478
HGC27	Growth Inhibition Assay				IC50=15.0 ± 4.82 μM	24597478
MKN45	Growth Inhibition Assay				IC50=0.82 ± 0.01 μM	24597478
NUGC4	Growth Inhibition Assay				IC50=2.93 ± 0.31 μM	24597478
PC9	Growth Inhibition Assay		72 h		IC50=10.15±0.62 nM	23874880
PC9GR	Growth Inhibition Assay		72 h		IC50=6.21±1.30 nM	23874880
H1650	Growth Inhibition Assay		72 h		IC50=7.61±0.62 nM	23874880
H1975	Growth Inhibition Assay		72 h		IC50=11.15±0.93 nM	23874880
PC9	Function Assay	10.15 nM	72 h		inhibits mTOR phosphorylation status	23874880
PC9GR	Function Assay	6.21 nM	72 h		inhibits mTOR phosphorylation status	23874880
H1650	Function Assay	7.61 nM	72 h		inhibits mTOR phosphorylation status	23874880
H1975	Function Assay	11.15 nM	72 h		inhibits mTOR phosphorylation status	23874880
PC9	Function Assay	10.15 nM	72 h		inhibits phosphorylation of p70S6K	23874880
PC9GR	Function Assay	6.21 nM	72 h		inhibits phosphorylation of p70S6K	23874880
H1650	Function Assay	7.61 nM	72 h		inhibits phosphorylation of p70S6K	23874880
H1975	Function Assay	11.15 nM	72 h		inhibits phosphorylation of p70S6K	23874880
LNCaP	Cell Viability Assay	0-10 μM	24 h		decreases cell viability in a dose dependent manner	23840605
PC-3	Cell Viability Assay	0-10 μM	24 h		decreases cell viability in a dose dependent manner	23840605
MDA-MB-468	Cell Viability Assay	0-10 μM	24 h		decreases cell viability in a dose dependent manner	23840605
LNCaP	Function Assay	200–800 nM	24 h		decreases the phosphorylation level of p70S6K in a dose dependent manner	23840605
PC-3	Function Assay	200–800 nM	24 h		decreases the phosphorylation level of p70S6K in a dose dependent manner	23840605
MDA-MB-468	Function Assay	200–800 nM	24 h		decreases the phosphorylation level of p70S6K in a dose dependent manner	23840605
Caki-1	Function Assay	100-2000 nM	10-180 min	DMSO	inhibits both mTORC1 and mTORC2 as indicated by the decrease in phosphorylation of downstream effectors	23349989
786-O	Function Assay	100-2000 nM	10-180 min	DMSO	inhibits both mTORC1 and mTORC2 as indicated by the decrease in phosphorylation of downstream effectors	23349989
Caki-1	Cell Viability Assay	300-4000 nM	24-96 h	DMSO	suppresses the cell viability in both time and dose dependent manner	23349989
786-O	Cell Viability Assay	300-4000 nM	24-96 h	DMSO	suppresses the cell viability in both time and dose dependent manner	23349989
Caki-1	Function Assay	2 µM	72 h	DMSO	induces G1 cell cycle arrest and autophagy	23349989
786-O	Function Assay	2 µM	72 h	DMSO	induces G1 cell cycle arrest and autophagy	23349989
HEK293	Function assay		2 hrs		Inhibition of recombinant FLAG-tagged mTOR expressed in HEK293 cells using biotinylated p70S6K substrate after 2 hrs by alphascreen competition assay, IC50=0.003μM	19762236
HBCx-10	Function assay	5 mg/kg			Potentiation of irinotecan-induced tumor regression against human HBCx-10 cells xenografted in immunocompromised mouse at 5 mg/kg, po qd administered on days 1 to 3 of weekly cycle	19762236
U87MG	Function assay		2 hrs		Inhibition of mTORC1 in human U87MG cells assessed as phosphorylated S6 ribosomal protein (Ser235/236) level after 2 hrs by Western blotting, IC50=0.1μM	19762236
U87MG	Function assay		2 hrs		Inhibition of mTORC2 in human U87MG cells assessed as phosphorylated AKT (Ser473) level after 2 hrs by Western blotting, IC50=0.15μM	19762236
T47D	Antiproliferative assay		120 hrs		Antiproliferative activity against human T47D cells after 120 hrs by SRB assay, GI50=0.35μM	19762236
HEK293	Function assay				Inhibition of recombinant FLAG-tagged mTOR (1362 to 2549) (unknown origin) expressed in HEK293 cells, IC50=0.0025μM	23375793
MDA-MB-468	Function assay		2 hrs		Inhibition of mTORC2 in human MDA-MB-468 cells assessed as reduction of AKT phosphorylation at Ser473 after 2 hrs, IC50=0.24μM	23375793
MDA-MB-468	Function assay		2 hrs		Inhibition of mTORC1 in human MDA-MB-468 cells assessed as reduction of pS6 phosphorylation at Ser235/236 after 2 hrs, IC50=0.66μM	23375793
HEK293	Function assay		30 mins		Inhibition of mTORC1 in HEK293 cells using GST-tagged S6K1 or Akt1 as substrate after 30 mins by immunoblotting assay, IC50=0.01μM	29211480
PC3	Function assay	100 mg/kg			Inhibition of Akt phosphorylation at Ser473 in PTEN-deficient human PC3 cells xenograft mouse model at 100 mg/kg, po single dose measured up to 8 hrs	29211480
PC3	Antitumor assay	30 mg/kg			Antitumor activity against human PC3 cells xenograft mouse model assessed as inhibition of tumor growth at 30 mg/kg, po bid in presence of 1-aminobenzotriazole	29211480
PC3	Antitumor assay	60 mg/kg			Antitumor activity against human PC3 cells xenograft mouse model assessed as inhibition of tumor growth at 60 mg/kg, po bid in presence of 1-aminobenzotriazole	29211480
HEK293	Function assay		30 mins		Inhibition of mTORC2 in HEK293 cells using GST-tagged S6K1 or Akt1 as substrate after 30 mins by immunoblotting assay, IC50=0.01μM	29211480
SW620	Function assay	20 mg/kg			Potentiation of irinotecan-induced tumor regression against human SW620 cells xenografted in immunocompromised mouse at 20 mg/kg, po qd administered on days 2 to 4 of weekly cycle	29211480
SJ-GBM2	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
Rh41	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells	29435139
A673	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for A673 cells)	29435139
BT-12	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells	29435139
DAOY	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SJ-GBM2 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells	29435139
Rh41	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh41 cells	29435139
RD	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for RD cells	29435139
Rh18	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh18 cells	29435139
Rh30	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh30 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay				qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-SH cells	29435139
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화학 정보, 보관 및 안정성

분자량	465.54	화학식	C₂₅H₃₁N₅O₄	보관 (수령일로부터)	3년-20°C분말
CAS 번호	938440-64-3	SDF 다운로드		원액 보관	1년-80°C용매에 보관 1개월-20°C용매에 보관
동의어	N/A			Smiles	CC1CN(CC(O1)C)C2=NC3=C(C=CC(=N3)C4=CC(=C(C=C4)OC)CO)C(=N2)N5CCOCC5

용해도

In vitro
배치:

DMSO : 16 mg/mL (34.36 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 16 mg/mL (34.36 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 20 mg/mL (42.96 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 16 mg/mL (34.36 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 16 mg/mL (34.36 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량	농도	부피	분자량
=	×	×

희석 계산기 분자량 계산기

In vivo 배치:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Selleck 연구소에서 검증되었습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.	30.000mg/ml (64.44mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

투여량: mg/kg 동물 평균 체중: g 동물당 투여량:μL 동물 수:

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH₂O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘

Targets/IC₅₀/Ki	mTORC1 (Cell-free assay) ~10 nM mTORC2 (Cell-free assay) ~10 nM
시험관 내(In vitro)	mTOR 억제제 PP242와 비교할 때, KU-0063794는 PI3K 또는 76개의 다른 키나제에 대해 비활성이므로 mTOR에 대한 더 높은 특이성을 보입니다. HEK-293 세포에서 이 화합물 30 nM은 소수성 모티프(Thr³⁸⁹)의 인산화를 차단하고 이어서 T-루프 잔기(Thr²²⁹)의 인산화를 차단함으로써 S6K1 활성을 신속하게 제거하기에 충분합니다. 혈청 결핍 HEK-293 세포의 IGF1 자극의 경우, 이 화합물 300 nM이 S6K1 활성을 약 90% 억제하는 데 필요합니다. 이 화학 물질 100-300 nM은 또한 아미노산 유도 S6K1 및 S6 단백질의 인산화를 완전히 억제합니다. S6K1과 유사하게, mTORC1의 Ser²⁴⁴⁸ 및 mTORC2의 Ser²⁴⁸¹의 인산화를 용량 의존적 및 시간 의존적으로 억제합니다. 혈청 존재 하 또는 IGF1 자극 후, 이 화합물은 Akt의 Ser⁴⁷³ 및 예상치 못한 Thr³⁰⁸의 활성 및 인산화뿐만 아니라 Akt 기질 PRAS40의 Thr²⁴⁶, GSK3α/GSK3β의 Ser²¹/Ser⁹ 및 Foxo-1/3a의 Thr²⁴/Thr³²의 인산화를 용량 의존적으로 억제합니다. 이 화합물은 라파마이신과 달리 SGK1 활성 및 Ser⁴²² 인산화뿐만 아니라 그 생리적 기질 NDGR1을 S6K1 및 Akt 인산화와 동일한 정도로 용량 의존적으로 억제하는 반면, 포르볼 에스테르 유도 ERK 또는 RSK 인산화 및 RSK 활성화는 억제하지 않습니다. 라파마이신과 비교할 때, 이 화학 물질은 Thr³⁷, Thr⁴⁶ 및 Ser⁶⁵에서 4E-BP1의 완전한 탈인산화를 유도하는 데 더 중요한 효능을 보입니다. 야생형 및 mLST8 결핍 MEF 모두의 세포 성장을 억제하고 G1 세포 주기 정지를 유도하며, 라파마이신보다 더 중요합니다.
키나아제 분석	mTOR 복합체 키나제 분석
키나아제 분석	HEK-293 세포를 Hepes 용해 완충액에 신선하게 용해합니다. 용해물(1-4 mg)은 전면역 IgG에 접합된 Protein G-Sepharose 5-20 μL와 함께 배양하여 사전 제거합니다. 그런 다음 용해물 추출물을 5-20 μL의 Protein G-Sepharose에 접합된 5-20 μg의 항-Rictor 또는 항-Raptor 항체 또는 전면역 IgG와 함께 배양합니다. 모든 항체는 Protein G-Sepharose에 공유 결합되어 있습니다. 면역침전은 진동 플랫폼에서 4 °C에서 1시간 동안 수행됩니다. 면역침전물은 Hepes 용해 완충액으로 4번 세척한 다음 Hepes 키나제 완충액으로 2번 세척합니다. S6K1 인산화에 사용되는 Raptor 면역침전물의 경우, 초기 두 번의 세척 단계에서 완충액에는 최적의 키나제 활성을 보장하기 위해 0.5 M NaCl이 포함됩니다. GST-Akt1은 PI-103 (1 μM, 1시간)과 함께 배양된 혈청 결핍 HEK-293 세포에서 분리됩니다. GST-S6K1은 라파마이신 (0.1 μM, 1시간)과 함께 배양된 혈청 결핍 HEK-293 세포에서 정제됩니다. mTOR 반응은 다양한 농도의 KU-0063794 및 GST-Akt1 (0.5 μg) 또는 GST-S6K1 (0.5 μg) 존재 하에 0.1 mM ATP 및 10 mM MgCl₂를 첨가하여 시작됩니다. 반응은 진동 플랫폼에서 30 °C에서 30분 동안 수행되고 SDS 샘플 완충액을 첨가하여 중단됩니다. 반응 혼합물은 0.22 μm 기공 크기 Spin-X 필터를 통해 여과되고 샘플은 표시된 항체를 사용하여 전기영동 및 면역 블롯 분석에 제출됩니다.
생체 내(In vivo)	Ku0063794는 전임상 신장 세포 암종 모델에서 종양 성장 및 mTOR 신호 전달을 억제합니다. 그러나 이 화합물은 동물 연구에서 더 효과적이지 않았습니다. 이 화학 물질의 생체 내에서 더 큰 활성이 부족한 이유에 대한 가능한 설명은 다음과 같습니다..
참조	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19402821/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23349989/

적용 분야

방법	바이오마커	이미지	PMID
Western blot	p-mTOR p-S6K / S6K / p-4E-BP1 / E7 / E6 / p53		24262658

기술 지원

취급 설명서

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

다른 문의사항이 있으시면 메시지를 남겨주세요.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):