연구용
PF-5274857 Hedgehog/Smoothened 길항제
제품 번호S2777
화학 구조
분자량: 436.96
품질 관리
화학 정보, 보관 및 안정성
| 분자량 | 436.96 | 화학식 | C20H25ClN4O3S |
보관 (수령일로부터) | |
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| CAS 번호 | 1373615-35-0 | SDF 다운로드 | 원액 보관 |
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| 동의어 | N/A | Smiles | CC1=CC(=C(N=C1)C2=CC(=NC=C2Cl)N3CCN(CC3)C(=O)CCS(=O)(=O)C)C | ||
용해도
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In vitro |
DMSO
: 93 mg/mL
(212.83 mM)
Water : 93 mg/mL Ethanol : Insoluble |
몰농도 계산기
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In vivo |
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생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)
1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)
2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)
계산 결과:
작업 농도: mg/ml;
DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )
생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.
생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.
참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.
작용 메커니즘
| Targets/IC50/Ki |
Smoothened
4.6 nM(Ki)
Smoothened
5.8 nM
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| 시험관 내(In vitro) |
PF-5274857은 MEF 세포에서 Smo 하류 유전자 Gli1의 전사 활성으로 측정한 IC50 2.7 nM으로 Shh 유도 Hh 경로 활성을 완전히 억제합니다. μ-오피오이드 수용체는 기능 분석에서 36 μM의 해리 상수로 나중에 결정된 이 화합물에 의해 약하게 억제됩니다.
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| 키나아제 분석 |
생화학 분석
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인간 Smo(아미노산 181-787)를 과발현하는 HEK293 세포는 10% FBS, Pen-Strep 및 0.1 mg/mL 하이그로마이신이 보충된 Dulbecco's Modified Eagle's Media(DMEM)에서 90% 밀도까지 배양됩니다. 차가운 Dulbecco's PBS로 세척한 후, 세포 펠렛은 막 준비 완충액(50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 250 mM 수크로스 및 Roche 완전 프로테아제 칵테일)에 재현탁되고 균질화됩니다. 균질액은 원심분리되고 세포 펠렛은 분석 완충액(50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM NaCl, 25 mM MgCl2, 1 mM EDTA 및 0.1% 프로테아제 없는 소 혈청 알부민)에 재현탁되고 유리 조직 분쇄기로 균질화됩니다. Smo를 포함하는 막 준비물 내 총 단백질은 Pierce BCA 단백질 분석을 사용하여 결정됩니다. 경쟁적 결합 분석을 위해 96웰 GF/B 필터 플레이트에 100 μL의 분석 완충액을 10분 동안 추가하여 필터를 미리 적신 다음 제거합니다. 이어서 다음 시약이 추가됩니다: 20 μL의 분석 완충액, 10 μL의 이 화합물 연속 희석액, 20 μL의 3H-Smo 길항제(최종 농도 3 nM) 및 50 μL의 막 준비물(총 단백질 40 μg). 플레이트는 실온에서 2시간 동안 배양된 후 세척하고 진공 건조됩니다. 플레이트는 45 μL의 Microscint 20을 추가하기 전에 60°C 오븐에서 1시간 동안 건조되고 실온에서 30분에서 1시간 동안 배양된 후 TopCount 섬광 계수기로 계수됩니다. 데이터는 GraphPad Prism 소프트웨어를 사용하여 분석됩니다.
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| 생체 내(In vivo) |
PF-5274857은 유의미한 용량 의존적 종양 성장 억제(TGI)를 보이며 고용량(>10 mg/kg)에서 종양 퇴행을 유도합니다. 이 화합물은 Gli1, Gli2, Ptch1 및 Ptch2 유전자 발현 수준을 다양한 정도로 하향 조절하며, 최대 효과는 투여 후 6시간에서 12시간 사이에 달성됩니다(Gli1이 가장 민감한 유전자임). 반면 Smo 수준에는 거의 영향을 미치지 않습니다. 피부 조직에서도 이 화학물질에 의해 Gli1 및 Gli2의 하향 조절이 유사한 시간 경과와 함께 관찰됩니다. Ptch+/−p53+/− 수모세포종 동종이식 마우스에서 이 화합물에 의한 종양 Gli1 mRNA 생산 속도(IC50)의 절반 최대 억제에 대한 모델 유래 약물 농도는 8.9 nM로 결정되었으며, 이는 이 농도에서 6일간의 혈장 노출 후 119% TGI의 종양 퇴행에 수학적으로 해당합니다. Ptch+/−p53−/− 수모세포종 동종이식 마우스에서 IC50 값은 3.5 nM로 추정되었으며, 이는 Ptch+/−p53+/− 결과와 일치합니다. 또한 투여 후 4시간 이내에 쥐의 혈뇌장벽을 통과할 수 있습니다.
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참조 |
기술 지원
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