Home PI3K/Akt/mTOR mTOR inhibitor WYE-125132 (WYE-132)

연구용

WYE-125132 (WYE-132) mTOR inhibitor

제품 번호: S2661

WYE-125132 (WYE-132) is a highly potent, ATP-competitive mTOR inhibitor with IC50 of 0.19 nM; it is highly selective for mTOR versus PI3Ks or PI3K-related kinases hSMG1 and ATR.
WYE-125132 (WYE-132) mTOR inhibitor Chemical Structure

화학 구조

분자량: 519.6

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품질 관리 (Quality Control)

배치: S266101 DMSO]104 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false 순도: 100.00%
100.00

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
LNCAP cells Cytotoxicity assay Cytotoxicity against human LNCAP cells, IC50=0.002 μM
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 519.6 화학식

C27H33N7O4

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 1144068-46-1 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles CNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(C=NN3C4CCC5(CC4)OCCO5)C(=N2)N6CC7CCC(C6)O7

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 104 mg/mL (200.15 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

특징
A highly potent, ATP-competitive, and specific mTOR kinase inhibitor.
Targets/IC50/Ki
mTOR
(Cell-free assay)
0.19 nM
시험관 내(In vitro)
WYE-125132 (WYE-132) potently and ATP-competitively inhibits recombinant mTOR kinase with IC50 of 0.19 nM and also shows high selectivity over various PI3Ks and a panel of 230 protein kinases. In vitro, it exhibits significant anti-proliferative activity against a panel of tumor cell lines with IC50 ranging from 2 nM (LNCap) to 380 nM (HTC116). Besides, this compound also causes cell cycle progression, induction of apoptosis, and inhibition of protein synthesis and cell size. It results in a significant reduction in the synthesis of pre-tRNALeu by 72%, 80%, and 53% in actively proliferating cells of MG63, MDA361, and HEK293, respectively by inhibiting mTORC1. Moreover, WYE-125132 is also found to induce the dephosphorylation of Maf1 (negative regulator of Pol III transcription) and its accumulation in the nucleus.
키나아제 분석
Kinase assays
WYE-125132 (WYE-132)에 대한 mTOR 효소 분석은 DELFIA(dissociation-enhanced lanthanide fluorescent immunoassay), ATP 매트릭스 분석 및 mTOR 면역 복합체 키나아제 분석을 통해 다음과 같이 수행됩니다. LNCap 세포 용해물의 내인성 TOR을 anti-FRAP/TOR (N-19)로 면역 침전시킵니다. 1 mL 용해 완충액에서 세포 용해물(1.0 mg)을 단백질-G/A 아가로스에 결합된 4 μg 항체와 혼합합니다. 면역 복합체를 용해 완충액, 500 mM KCl이 포함된 용해 완충액, 키나아제 완충액으로 순차적으로 세척합니다. 면역 복합체를 10 mM Hepes(pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycerophosphate, 0.5 μM microcystin LR, 1 mM DTT, 10 mM MnCl2, 100 μM ATP, 1 μg His6-S6K 또는 1 μg His6-4EBP1을 포함하는 50 μL의 최종 부피에서 30 °C로 30분 동안 키나아제 반응을 수행합니다. 키나아제 반응(면역 복합체 및 정제된 효소)은 NuPAGE LDS 샘플 완충액으로 종료시키고, anti-P(T389)-p70S6K 및 anti-P(T46)-4EBP1, anti-FRAP/TOR (N-19), anti-FLAG M2, anti-His6 (Clone His-1)를 이용한 웨스턴 블로팅을 위해 4-12% NuPAGE Bis-Tris 겔에서 분리합니다. 방사성 분석에서는 10 μCi [γ-32P]ATP(3000 Ci/mmol) 및 100 μM cold ATP를 사용합니다. 32P-표지된 산물은 SDS-PAGE로 분리하고 Kodak X-ray 필름에 대한 방사선 사진으로 확인합니다.
생체 내(In vivo)
WYE-125132 (WYE-132) (5 mg/kg p.o.) produces significant antitumor activity and causes dose-dependent tumor growth delay in the PI3K/mTOR- and HER2-hyperactive MDA361 tumor model. In addition, it also shows potent antitumor efficacy in the PTEN-null glioma U87MG, non-small cell lung cancer H1975 and A549 models.
참조

자주 묻는 질문 (Frequently Asked Questions)

질문 1:
Whether the vehicle “30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol” you recommended for it is a clear solution or not? What’s the suggested formula for i.p. injection?

답변:
The formula on our website “30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol” is not a clear solution and can be used for p.o. administration. For i.p. solution, there are two methods to prepare it: 1）2% DMSO+30% PEG 300+ddH2O, 2.5mg/ml, stable for 1h at RT; 2）2% DMSO+30% PEG 300+ 2% Tween80 +ddH2O, 2.5mg/ml, stable for 2h at RT.