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연구용

JNK-IN-8 JNK 억제제

제품 번호: S4901

JNK-IN-8(JNK Inhibitor XVI)은 JNK1, JNK2, JNK3에 대한 최초의 비가역적 JNK 억제제로, A375 세포주에서 각각 4.7 nM, 18.7 nM, 1 nM의 IC50 값을 보이며 MNK2, Fms에 대해 10배 이상의 선택성을 가지고 c-Kit, Met, PDGFRβ에는 억제 효과가 없습니다.
JNK-IN-8 JNK 억제제 Chemical Structure

화학 구조

분자량: 507.59

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품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.16%
99.16

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
human HeLa cells Function assay 1 h Inhibition of JNK3-mediated c-jun phosphorylation in human HeLa cells after 1 hr incubation, IC50=0.486 μM 25415535
human A375 cells Function assay 1 h Inhibition of JNK3-mediated c-jun phosphorylation in human A375 cells after 1 hr incubation, IC50=0.338 μM 25415535
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 507.59 화학식

C29H29N7O2

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 1410880-22-6 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 JNK Inhibitor XVI Smiles CC1=C(C=CC(=C1)NC(=O)C2=CC(=CC=C2)NC(=O)C=CCN(C)C)NC3=NC=CC(=N3)C4=CN=CC=C4

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 100 mg/mL (197.0 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

특징
JNK-IN-8 and JNK-IN-7 are structurally very similar, but whereas the former is a specific covalent inhibitor of JNKs.
Targets/IC50/Ki
JNK3
(A375 cells)
1 nM
JNK1
(A375 cells)
4.7 nM
JNK2
(A375 cells)
18.7 nM
Kit (V559D,T670I)
(A375 cells)
56 nM
Kit (V559D)
(A375 cells)
92 nM
시험관 내(In vitro)

JNK-IN-8 inhibits c-Jun phosphorylation in HeLa and A375 cells with EC50 of 486 nM and 338 nM, respectively. This compound shows a dramatic improvement in selectivity and eliminated binding to IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C, and PIP5K3. It requires Cys116 for JNK2 inhibition.

This chemical (10 mM) suppresses the IL-1β-stimulated phosphorylation of c-Jun in IL-1R cells, an established substrate of the JNKs. It covalently attaches to the JNK isoforms caused a small retardation in the electrophoretic mobility of the JNK isoforms.

It is discovered to inhibit JNK kinase by broad-based kinase selectivity profiling of a library of acrylamide kinase inhibitors based on the structure of using the KinomeScan approach. This compound possesses distinct regiochemistry of the 1,4-dianiline and 1,3-aminobenzoic acid substructures. It adopts an L-shaped type I binding conformation to access Cys 154 located toward the lip of the ATP-binding site.

키나아제 분석
결합 동태 분석
결합 동역학 분석을 위해 A375 세포를 1 μM JNK-IN-8로 표시된 시간 동안 전처리합니다. 배지를 제거하고 PBS로 3회 세척합니다. 세포 펠릿을 1 mL 용해 버퍼(1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail 및 Protease Inhibitor Cocktail)에 재현탁합니다. 4℃에서 30분 동안 회전 교반합니다. 용해물을 Eppendorf 원심분리기에서 1.4×104 rpm으로 15분간 원심분리하여 상층액을 얻습니다. 상층액을 10DG 컬럼을 사용하여 Kinase Buffer(0.1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, Protease Inhibitor Cocktail)로 겔 여과합니다. 겔 여과된 용해물의 총 단백질 농도는 약 5–15 mg/ml이어야 합니다. 세포 용해물을 5 μM의 ActivX 프로브로 1시간 동안 표지합니다. 샘플을 DTT로 환원시키고, 요오드아세트아미드로 시스테인을 차단한 후 겔 여과하여 과량의 시약을 제거하고 버퍼를 교환합니다. 1 vol의 2× Binding Buffer(2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS)와 50 μL의 스트렙타비딘 비드 슬러리를 첨가하고 2시간 동안 회전 교반한 뒤, 7,000 rpm에서 2분간 원심분리합니다. 1× Binding Buffer로 3회, PBS로 3회 세척합니다. 비드에 30 μL의 1× 샘플 버퍼를 첨가하고 95℃에서 10분간 가열합니다. 샘플을 110V에서 SDS-PAGE 젤에 전기영동합니다. 전사 후, 멤브레인을 JNK 항체로 면역블롯팅합니다.
생체 내(In vivo)

JNK-IN-8 is a potent JNK inhibitor that specially targets JNK activation. It has anti-fungal activity.
참조
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28112734/

적용 분야 (Applications)

방법 바이오마커 이미지 PMID
Western blot c-Jun / p-c-Jun / ATF2 / p-ATF2 / Elk-1 / pElk-1 Notch1 / c-Myc / Cyclin D1 / p21
S4901-WB1
27941886
Growth inhibition assay Cell viability
S4901-viability1
25847947