Home Cell Cycle Aurora Kinase 억제제 Hesperadin

연구용

Hesperadin Aurora B 억제제

제품 번호: S1529

Hesperadin은 무세포 분석에서 250 nM의 IC50으로 Aurora B를 강력하게 억제합니다. 이 물질은 AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1 및 PHK의 활성을 현저히 감소시키지만 생체 내(in vivo)에서는 MKK1 활성을 억제하지 않습니다.
Hesperadin Aurora Kinase 억제제 Chemical Structure

화학 구조

분자량: 516.65

바로가기

품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.09%
99.09

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
HepG2 cells Cytotoxicity assay 48 h Cytotoxicity against human HepG2 cells after 48 hrs by MTT assay, TC50=0.2 μM
클릭하여 더 많은 세포주 실험 데이터 보기

화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 516.65 화학식

C29H32N4O3S

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 422513-13-1 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles CCS(=O)(=O)NC1=CC2=C(C=C1)NC(=C2C(=NC3=CC=C(C=C3)CN4CCCCC4)C5=CC=CC=C5)O

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 100 mg/mL (193.55 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TbAUK1
(Cell-free assay)
40 nM
Aurora B (human)
(Cell-free assay)
250 nM
시험관 내(In vitro)
Hesperadin inhibits the ability of immunoprecipitated Aurora B to phosphorylate histone H3 with IC50 of 250 nM and markedly reduces the activity of other kinases (AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1, and PHK) at a concentration of 1 μM. In contrast, only 20-100 nM of this compound is sufficient to induce the loss of mitotic histone H3-Ser10 phosphorylation in HeLa cells. Its treatment causes defects in mitosis and cytokinesis, leading to stoppage of proliferation of HeLa cells and polyploidization, which can be specifically ascribed to the inhibition of Aurora B function during the process of chromosome attachment. This compound (100 nM) quickly overrides the mitotic arrest induced by taxol or monastrol but not by nocodazole. It and nocodazole treatment in HeLa cells abolishes kinetochore localization of BubR1 and diminishes the intensity of Bub1 at kinetochores, suggesting that Aurora B function is required for efficient kinetochore recruitment of BubR1 and Bub1, which in turn might be necessary for prolonged checkpoint signaling. It prevents the phosphorylation of recombinant trypanosome histone H3 by the T. brucei Aurora kinase-1 (TbAUK1) from pathogenic Trypanosoma brucei with IC50 of 40 nM in vitro kinase assays. This chemical significantly inhibits cell growth of cultured infectious bloodstream forms (BF) with IC50 of 48 nM, and only weakly inhibits cell growth of insect stage procyclic forms (PF) with IC50 of 550 nM.
키나아제 분석
Aurora Kinase B 분석
Aurora B kinase assay를 위해, HeLa 세포를 50 mM NaCl이 포함된 완충액에서 용해합니다. 전체 세포 추출물은 탁상용 원심분리기를 사용하여 4 °C에서 20분 동안 13,000 rpm으로 회전시킵니다. 200 mg의 전체 세포 추출물에서 얻은 펠릿을 유사분열 염색질로부터 활성 Aurora B kinase를 얻기 위해 250 mM NaCl이 포함된 15 mL 용해 완충액에서 다시 추출합니다. 후자의 추출물에서 얻은 저속 상등액을 면역침강에 사용합니다. 단일클론 마우스 anti-AIM-1 또는 마우스 anti-HA를 GammaBind Plus Sepharose에 결합시키고, 비드를 4 °C에서 90분 동안 추출물 내에서 회전시킵니다. 비드를 세척하고 분주한 뒤, kinase 완충액(20 mM Tris, pH 7.5, 150 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 10 mM NaF)으로 세척합니다. Kinase assay는 5 μg histone H3, 10 μM ATP, 2.5 μCi [γ-32P]ATP 및 다양한 농도의 이 화합물을 포함하는 20 μL kinase 완충액에서 10 μL 비드를 사용하여 37 °C에서 20분 동안 수행합니다. SDS 샘플 완충액을 첨가한 후, 샘플을 끓여서 SDS-PAGE로 분리합니다. 젤을 건조하고 방사성 신호를 PhosphorImager 분석을 통해 검출합니다. 데이터는 ImageQuant 소프트웨어를 사용하여 분석합니다.
참조

적용 분야 (Applications)

방법 바이오마커 이미지 PMID
Western blot trypanosome histone H3
S1529-WB1
19320832