Home MAPK Raf 억제제 Agerafenib (CEP-32496)

연구용

Agerafenib (CEP-32496) Raf 억제제

제품 번호S8015

Agerafenib (CEP-32496)은 BRAF(V600E/WT) 및 c-Raf에 대한 매우 강력한 억제제로 Kd는 각각 14 nM/36 nM 및 39 nM입니다. 또한 Abl-1, c-Kit, Ret (c-Ret), PDGFRβ 및 VEGFR2에 대해 강력한 활성을 보이지만, MEK-1, MEK-2, ERK-1 및 ERK-2에 대한 친화성은 미미합니다. 이 화합물은 현재 1/2상 임상 시험 중입니다.
Agerafenib (CEP-32496) Raf 억제제 Chemical Structure

화학 구조

분자량: 517.46

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품질 관리

배치: S801501 DMSO]9 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false 순도: 99.19%
99.19

세포 배양, 처리 및 작업 농도

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of LCK in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of PDGFRbeta in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of cKit in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of Ret in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of Abl1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.003μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of VEGFR2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.008μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of CSF1R in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.009μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of EPHA2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of BRAF V600E mutant in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of EGFR in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.022μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of wild type BRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.036μM. 22168626
COLO205 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human COLO205 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.036μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of CRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.039μM. 22168626
A375 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human A375 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, IC50=0.078μM. 22168626
A375 Function assay 2 hrs Inhibition of BRAF V600E mutant-mediated MEK phosphorylation in human A375 cells after 2 hrs, IC50=0.082μM. 22168626
HCC827 Function assay Displacement of [3H]-cyclopamine from SMO V404M mutant in gefitinib resistant human HCC827 cells by scintillation counting, Ki=0.1878μM. 28787156
COLO679 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human COLO679 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.211μM. 22168626
HT144 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human HT144 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.228μM. 22168626
SK-MEL-28 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SK-MEL-28 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.454μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of cMET in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.513μM. 22168626
HCT116 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human HCT116 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.669μM. 22168626
Hs578T Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human Hs578T cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.736μM. 22168626
DU145 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human DU145 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.911μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of JAK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=4.7μM. 22168626
PC3 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human PC3 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.257μM. 22168626
LNCAP Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human LNCAP cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.631μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of MEK1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=7.1μM. 22168626
HEK293 Function assay 1 hr Inhibition of MEK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=8.3μM. 22168626
COLO205 Antitumor assay 10 mg/kg 14 days Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 10 mg/kg, po bid for 14 days 22168626
COLO205 Antitumor assay 30 mg/kg 14 days Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 30 mg/kg, po bid for 14 days 22168626
COLO205 Antitumor assay 100 mg/kg 14 days Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 100 mg/kg, po bid for 14 days 22168626
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화학 정보, 보관 및 안정성

분자량 517.46 화학식

C24H22F3N5O5

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 1188910-76-0 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 RXDX-105 Smiles CC(C)(C1=CC(=NO1)NC(=O)NC2=CC(=CC=C2)OC3=NC=NC4=CC(=C(C=C43)OC)OC)C(F)(F)F

용해도

In vitro
배치:

DMSO : 9 mg/mL (17.39 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘

특징
High binding affinity for both BRAF (V600E) mutation and related c-Raf, but no significant affinity for other kinases of MAPK pathway.
Targets/IC50/Ki
c-Kit
2 nM(Kd)
LCK
2 nM(Kd)
PDGFRβ
2 nM(Kd)
RET
2 nM(Kd)
Abl1
3 nM(Kd)
VEGFR2
8 nM(Kd)
CSF-1R
9 nM(Kd)
B-Raf (V600E)
14 nM(Kd)
EphA2
14 nM(Kd)
EGFR
22 nM(Kd)
B-Raf
36 nM(Kd)
C-Raf
39 nM(Kd)
c-Met
513 nM(Kd)
시험관 내(In vitro)
Agerafenib (CEP-32496)은 78 nM의 EC50으로 A375 세포(BRAFV600E) 증식을 억제합니다. 돌연변이 BRAF를 발현하는 종양 세포주(A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 및 HT-144)에 대해 야생형 BRAF를 발현하는 세포주(HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145 및 PC-3)보다 더 민감한 세포독성을 나타냅니다. 이 화합물은 인간 흑색종(A375) 및 대장암(Colo-205) 세포주에서 미토겐 활성화 단백질(MAP)/세포외 신호 조절(ER) 키나아제(MEK) 인산화(pMEK)를 각각 78 nM 및 60 nM의 IC50 값으로 억제합니다.
키나아제 분석
결합 분석
키나아제는 T7 파지에 표시되거나 HEK-293 세포에서 발현되어 DNA로 표지됩니다. 결합 반응은 실온에서 1시간 동안 수행되며, 테스트 화합물에 결합하지 않은 키나아제 분획은 고정된 친화성 리간드를 이용한 포획 및 정량적 PCR을 통한 정량화를 통해 결정됩니다. 각 키나아제는 Agerafenib (CEP-32496)에 대해 개별적으로 테스트됩니다. 이 화합물의 Kd 값은 11개의 3배 연속 희석을 사용하여 결정되며, 이중으로 수행된 실험의 평균값으로 제시됩니다. 개별 값 간의 변동은 2배 미만입니다.
생체 내(In vivo)
Agerafenib (CEP-32496)은 생쥐, 개, 원숭이 및 인간 간 미세소체 제제에서 우수한 안정성을 나타내며, 측정된 고유 청소율 값은 <23 (μL/min)/mg이고 모든 분석에서 t1/2 > 60분입니다. 이 화합물(30 mg/kg, 경구, BID)은 Colo-205 이종이식 마우스 모델에서 종양 정체 및 40%의 부분 종양 퇴행(PR) 발생률을 나타내며, 100 mg/kg 용량 그룹에서는 종양 정체 및 80%의 PR 발생률을 모두 나타냅니다. 이 화합물(30 mg/kg, 경구, BID)은 투여 후 2시간 및 6시간 시점에서 종양 용해물에서 정규화된 pMEK의 50% 및 75% 억제를 유도하며, 55 mg/kg 용량은 Colo-205 이종이식 마우스 모델에서 투여 후 2시간에서 10시간까지 pMEK의 75%에서 57% 억제를 유도합니다. 여러 전임상 종(쥐, 개, 원숭이에서 >95%)에서 경구 생체 이용률이 높습니다. 이 화합물(100 mg/kg)은 누드 마우스의 BRAF(V600E) 대장암 이종이식편에서 pMEK 및 pERK 억제와 지속적인 종양 정체 및 퇴행을 유도합니다.
참조

적용 분야

방법 바이오마커 이미지 PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S8015-viability1
31695841
Western blot p-RET / RET / p-PLCγ / PLCγ / p-ERK / ERK / p-MEK / MEK
S8015-WB1
28011461

기술 지원

취급 설명서

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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