Name: PHA-767491 HCl
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2742
Rating: 5 (45 reviews)

바로가기

품질 관리

배치: 순도: 99.96%

99.96

관련 타겟	HSP PD-1/PD-L1 ROCK Wee1 DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Aurora Kinase Casein Kinase
기타 CDK 억제제	AS2863619 Ro-3306 SEL120 (SEL120-34A) hydrochloride INX-315 Tagtociclib (PF-07104091) PF-07220060 (CDK4/6-IN-6) AZD4573 ON123300 Enitociclib (BAY 1251152) Samuraciclib (ICEC0942) hydrochloride

세포 배양, 처리 및 작업 농도

세포주	분석 유형	농도	배양 시간	활성 설명
human SF268 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against p53 deficient human SF268 cells after 72 hrs, IC50=0.86 μM
human HCT116 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human HCT116 cells expressing p53 gene after 72 hrs by proliferative assay, IC50=0.97 μM
human HCT16 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human HCT16 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1 μM
human SW403 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human SW403 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1 μM
human A2780 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human A2780 cells expressing p53 gene after 72 hrs by proliferative assay, IC50=1.07 μM
human SW48 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human SW48 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1.2 μM
human MCF7 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human MCF7 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1.3 μM
human U2OS cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human U2OS cells expressing p53 gene after 72 hrs by proliferative assay, IC50=1.49 μM
human COLO205 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human COLO205 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1.5 μM
human OVCAR8 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against p53 deficient human OVCAR8 cells after 72 hrs by proliferative assay, IC50=1.56 μM
human L363 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human L363 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1.6 μM
human NHDF cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human NHDF cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1.6 μM
human NCI-H929 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human NCI-H929 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=1.8 μM
human SF539 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human SF539 cells expressing p53 gene after 72 hrs by proliferative assay, IC50=2.34 μM
human SW480 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against p53 deficient human SW480 cells after 72 hrs by proliferative assay, IC50=2.67 μM
human NCI60 cells	Proliferation assay			Antiproliferative activity against human NCI60 cells, IC50=3.1 μM
human Jurkat cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against p53 deficient human Jurkat cells after 72 hrs by proliferative assay, IC50=3.2 μM
human HCT15 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human HCT15 cells expressing p53 gene after 72 hrs by proliferative assay, IC50=3.81 μM
human OPM2 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human OPM2 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=4.5 μM
human HT-29 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against human HT-29 cells after 72 hrs by luciferase based assay, IC50=5 μM
human K562 cells	Proliferation assay		72 h	Antiproliferative activity against p53 deficient human K562 cells after 72 hrs, IC50=5.87 μM
U937 cells	Function assay			Inhibition of TNFalpha production in U937 cells, IC50=19 μM
human HeLa cells	Function assay	5 μM	24 h	Induction of apoptosis in human HeLa cells assessed as appearance of PARP at 5 uM after 24 hrs
NHDF	Function assay	5 μM	16 h	Induction of cell cycle arrest in thymidine deficient NHDF assessed as DNA synthesis in S-phase at 5 uM after 16hrs FACS analysis in presence of serum
클릭하여 더 많은 세포주 실험 데이터 보기

화학 정보, 보관 및 안정성

분자량	249.7	화학식	C₁₂H₁₁N₃O.HCl	보관 (수령일로부터)	3년-20°C분말
CAS 번호	942425-68-5	SDF 다운로드		원액 보관	1년-80°C용매에 보관 1개월-20°C용매에 보관
동의어	CAY10572, NMS 1116354			Smiles	C1CNC(=O)C2=C1NC(=C2)C3=CC=NC=C3.Cl

용해도

In vitro
배치:

DMSO : 24 mg/mL (96.11 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 43 mg/mL (172.2 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량	농도	부피	분자량
=	×	×

희석 계산기 분자량 계산기

In vivo 배치:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 30%PEG300 2 2%Tween80 3 63%ddH2O Selleck 연구소에서 검증되었습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.	1.000mg/ml (4.00mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 20 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 630 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

투여량: mg/kg 동물 평균 체중: g 동물당 투여량:μL 동물 수:

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH₂O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘

특징	The first inhibitor that directly affects the mechanisms controlling initiation as opposed to elongation in DNA replication.
Targets/IC₅₀/Ki	Cdc7 (Cell-free assay) 10 nM CDK9 (Cell-free assay) 34 nM GSK-3β (Cell-free assay) 220 nM CDK2 (Cell-free assay) 240 nM CDK1 (Cell-free assay) 250 nM CDK5 (Cell-free assay) 460 nM MK2 (Cell-free assay) 470 nM PLK1 (Cell-free assay) 980 nM
시험관 내(In vitro)	PHA-767491은 Cdk1, Cdk2 및 GSK3-β에 대해 약 20배, MK2 및 Cdk5에 대해 50배, PLK1 및 CHK2에 대해 100배의 선택성을 보입니다. PHA-767491은 SF-268에 대해 0.86 μM, K562에 대해 5.87 μM의 IC50으로 다양한 인간 세포주에서 세포 증식을 억제하며, 소수의 세포주에서만 작용하는 5-FU와 달리 거의 모든 세포주에서 p53 비의존적인 방식으로 세포자멸사를 유의하게 유도합니다. 기존 DNA 합성 억제제와 달리, 5 μM 농도의 PHA-767491 처리는 Cdc7 키나제 및 Cdc7 의존성 Ser40 부위의 Mcm2 인산화를 특이적으로 억제하여 DNA 복제 개시를 차단하지만 복제 포크 진행은 차단하지 않습니다. ABT-737 내성 OCI-LY1 및 SU-DHL-4 세포에서 상향 조절된 Mcl-1 수준은 3 μM 농도의 PHA-767491 처리로 인해 Cdk9 억제로 인해 유의하게 감소될 수 있으며, 이는 ABT-737에 대한 감수성 회복으로 이어집니다. PHA-767491의 직접적인 미토콘드리아 의존성 세포자멸사 유도 효과는 EC50 0.34-0.97 μM의 유사한 메커니즘을 통해 휴지기 만성 림프성 백혈병(CLL) 세포에 1 μM로 적용했을 때도 관찰됩니다. 반면 CD154 및 인터루킨-4에 의해 자극된 증식성 CLL 세포에서는 5 μM 농도의 PHA-767491 처리가 세포 사멸을 유발하기보다는 Cdc7 억제를 통해 DNA 합성을 폐지합니다.
키나아제 분석	시험관 내 키나제 분석
키나아제 분석	PHA-767491 (IC50)에 의한 Cdc7 및 CDK9 억제는 강력한 음이온 교환기(Dowex 1-X8 수지, 포름산염 형태) 기반 분석법을 사용하여 결정됩니다. 각 효소에 대해 ATP 및 특정 기질에 대한 절대 K_m 값이 먼저 결정되며, 각 분석은 최적화된 ATP/³³P-γ-ATP 혼합물(2K_m) 및 기질(5K_m) 농도에서 수행됩니다. Cdc7 키나제 분석은 50 mM Hepes pH 7.9, 15 mM MgCl₂, 2 mM β-글리세로포스페이트, 0.2 mg/mL BSA, 1 mM DTT, 3 μM Na₃VO₄, 2K_m ATP/³³P-γ-ATP 혼합물, 5K_m Mcm2 (aa 10-294), 37 nM 재조합 Cdc7/Dbf4 및 증가하는 농도의 PHA-767491을 포함하는 완충액에서 최종 부피 30 μL로 수행되며, 25 °C에서 1시간 동안 배양됩니다. CDK9 키나제 분석은 50 nM 재조합 Cdk9/사이클린 T를 사용하여 50 mM HEPES pH 7.5, 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 3 μM Na₃VO₄, 2K_m ATP/³³P-γ-ATP 혼합물, 5K_m RNA 폴리머라제 CDT 펩타이드 및 증가하는 농도의 PHA-767491을 포함하는 완충액에서 최종 부피 30 μL로 수행되며, 25 °C에서 1시간 동안 배양됩니다. 배양 후, 150 μL의 수지/포름산염(pH 3.0)을 첨가하여 반응을 중단하고 미반응 ³³P-γ-ATP를 포획하여 용액 내 인산화된 기질과 분리합니다. 1시간 휴식 후, 50 μL의 상층액을 Optiplate 96웰 플레이트로 옮깁니다. 150 μL의 Microscint 40을 첨가한 후, TopCount에서 방사능을 측정합니다.
생체 내(In vivo)	5일 동안 하루 두 번 PHA-767491을 투여하면 HL60 이종이식의 성장을 용량 의존적으로 유의하게 억제하며, 20 mg/kg 및 30 mg/kg 용량에서 각각 50% 및 92%의 TGI를 보입니다. 이러한 효과는 A2780, Mx-1 및 HCT-116 이종이식 모델과 유방암에서도 현저하며, Cdc7 억제 및 Cdc7 의존성 Ser40 부위에서 Mcm2 인산화 감소와 관련이 있습니다
참조	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18469809/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20197552/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21768328/

적용 분야

방법	바이오마커	이미지	PMID
Western blot	p-MCM2 / CDC7 RNA Pol II / p-RNA Pol II / Caspase-3 / PARP / Mcl-1 / XIAP / Bcl-xL / Bcl-2 / NOXA		24902048

기술 지원

취급 설명서

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

다른 문의사항이 있으시면 메시지를 남겨주세요.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PHA-767491 HCl CDK 억제제

화학 구조

분자량: 249.7