연구용
(R)-(-)-Gossypol (AT-101) acetic acid Bcl-2 억제제
제품 번호S2812
화학 구조
분자량: 578.61
품질 관리
화학 정보, 보관 및 안정성
| 분자량 | 578.61 | 화학식 | C30H30O8.C2H4O2 |
보관 (수령일로부터) | |
|---|---|---|---|---|---|
| CAS 번호 | 866541-93-7 | SDF 다운로드 | 원액 보관 |
|
|
용해도
|
In vitro |
DMSO
: 100 mg/mL
(172.82 mM)
Ethanol : 100 mg/mL Water : Insoluble |
몰농도 계산기
|
In vivo |
|||||
생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)
1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)
2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)
계산 결과:
작업 농도: mg/ml;
DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )
생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.
생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.
참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.
작용 메커니즘
| Targets/IC50/Ki |
Mcl-1
(Cell-free assay) 0.18 μM(Ki)
Bcl-2
(Cell-free assay) 0.32 μM(Ki)
Bcl-xL
(Cell-free assay) 0.48 μM(Ki)
|
|---|---|
| 시험관 내(In vitro) |
AT-101은 1.2 μM에서 7.4 μM 범위의 IC50을 가진 다양한 림프증식성 악성 종양 패널을 억제합니다. AT-101 (10 μM)은 미만성 거대 B세포 및 외투세포 림프종 세포주에서 농도 및 시간 의존적으로 Δψm을 파괴합니다. 카르필조밉(6 nM 또는 10 nM)과 병용한 AT-101 (1 μM 또는 2 μM)은 HBL-2 및 그란타 세포주에서 apoptosis를 유도합니다. AT-101 (20 μM 24시간)은 부유 배양 및 기질 공동 배양 모두에서 CLL 림프구의 중간 72% apoptosis 및 Mcl-1의 하향 조절을 유발합니다. 기질 세포는 검출 불가능한 수준의 항 apoptosis 단백질을 발현하지만, 활성화된 ERK 및 AKT 단백질은 높은 수준으로 발현하며 AT-101과 함께 apoptosis는 낮거나 없습니다. AT-101은 Jurkat T 및 U937 세포에서 각각 1.9 mM 및 2.4 mM의 ED50 값으로 시간 및 용량 의존적으로 apoptosis를 유도합니다. 방사선(32 Gy)과 병용한 AT-101 (10 μM)은 방사선 단독보다 더 많은 apoptosis를 유도하며 단일 제제 치료로 인한 효과의 합을 초과합니다. AT-101은 용량 및 시간 의존적으로 SAPK/JNK를 활성화합니다. AT-101 (10 µM)은 VCaP 세포에서 caspase-9, -3, -7의 활성화를 통해 apoptosis를 유도합니다. AT-101 (10 µM)은 VCaP 세포에서 Bcl-2 및 Mcl-1 발현을 감소시킵니다. AT-101 (< 20 μM)은 골수 미세 환경에서 기질 세포가 제공하는 자극적인 성장 효과에도 불구하고 다발성 골수종 세포의 성장을 억제할 수 있습니다. AT-101 (10 μM)은 카스파제 3, 카스파제 9 및 PARP의 활성화를 통해 다발성 골수종 세포에서 apoptosis를 유도합니다. AT-101 (10 μM)은 Bax/Bcl-2 비율 및 미토콘드리아 막 전위의 파괴를 통해 다발성 골수종 세포에서 apoptosis를 촉진합니다.
|
| 키나아제 분석 |
형광 편광 기반 결합 분석
|
|
경쟁적 결합 실험을 위해 Bcl-2 단백질(40 nM)과 FAM-Bid 펩타이드(2.5 nM)를 분석 완충액(100 mM 인산칼륨, pH 7.5; 100 μg/mL 소 감마 글로불린; 0.02% 아지드화나트륨)에 미리 배양합니다. Dynex 96-웰, 검은색, 둥근 바닥 플레이트에 있는 Bcl-2/FAM-Bid 용액에 DMSO에 있는 AT101 용액 5 μL를 첨가하여 최종 부피가 125 μL가 되도록 합니다. 각 실험에 대해 Bcl-2 및 Flu-Bid 펩타이드(0% 억제에 해당)를 포함하는 대조군과 FAM-Bid만 포함하는 다른 대조군을 각 분석 플레이트에 포함합니다. 4시간 배양 후, 울트라 플레이트 리더를 사용하여 485 nm 여기 파장 및 530 nm 방출 파장에서 밀리편광 단위(mP)로 편광 값을 측정했습니다. 결합된 펩타이드의 50%가 치환되는 억제제 농도인 IC50은 GraphPad Prizm 4 소프트웨어를 사용하여 수행된 비선형 최소 제곱 분석 및 곡선 피팅을 사용하여 플롯에서 결정됩니다. 비표지 Bid BH3 펩타이드는 양성 대조군으로 사용됩니다. Bcl-xL 단백질의 PF는 FAM-Bim 대신 6-카르복시플루오레세인 석신이미딜 에스테르(FAM-Bak)로 표지된 Bak BH3 펩타이드를 사용하여 신호를 최대화합니다. FAM-Bak는 Bcl-xL 단백질에 대해 6 nM의 Kd를 갖는 것으로 결정되었습니다. Bcl-xL에 대한 경쟁적 결합 분석은 다음 예외를 제외하고 Bcl-2에 대한 분석과 동일합니다. 50 mM Tris-Bis, pH 7.4 및 0.01% 소 감마 글로불린으로 구성된 다음 분석 완충액에 30 nM의 Bcl-xL 단백질과 2.5 nM의 FAM-Bak 펩타이드. Mcl-1 단백질의 PF는 FAM-Bid 펩타이드와 인간 Mcl-1 단백질을 사용합니다. FAM-Bid 펩타이드는 인간 Mcl-1 단백질에 1.71 nM의 Kd로 결합하는 것으로 결정되었습니다. Mcl-1에 대한 경쟁적 결합 분석은 다음 예외를 제외하고 Bcl-2에 대한 분석과 동일한 방식으로 수행됩니다. 25 mM Tris, pH 8.0; 150 mM NaCl 및 0.05% 플루로닉 산으로 구성된 다음 분석 완충액에 5 nM Mcl-1 및 1 nM Flu-Bid 펩타이드.
|
|
| 생체 내(In vivo) |
AT-101은 RL-DLBCL 이종이식편을 가진 SCID 베이지 마우스에서 35 mg/kg 그룹의 경우 0.49 μM, 200 mg/kg 그룹의 경우 0.39 μM의 평균 농도로 혈장에서 여전히 검출됩니다. AT-101의 최고 혈장 농도는 두 용량 수준 모두에서 약물 투여 30분 후에 관찰되었으며, 200 mg/kg 그룹은 35 mg/kg 그룹보다 거의 4배 높은 혈장 평균 농도(각각 7.88 μM 및 27.78 μM)를 SCID 베이지 마우스에서 보였습니다. AT-101 (25 mg/kg ~ 100 mg/kg, 경구 투여)은 SCID 베이지 마우스에서 전처리 체중의 10% 이상에 해당하는 체중 감소 및 사망의 조기 발병을 무기한으로 유발합니다. AT-101 (35 mg/kg, 10일 동안 매일 경구 투여)과 복강내 사이클로포스파미드(Cy) 및 복강내 리툭시맙(R)은 다른 치료 그룹에 비해 유의미한 종양 부피 제어를 보였습니다. 온전한 마우스에서 단일 제제로서 AT-101 (15 mg/kg, p.o., 주 5일)은 2주에서 6주에 걸쳐 미처리 종양에 비해 VCaP 종양 성장의 발달을 유의미하게 감소시킵니다. 수술적 거세와 병용한 AT-101은 마우스에서 거세 단독 또는 AT-101 단독 그룹에 비해 안드로겐 비의존성 VCaP 종양 성장의 발병을 지연시킵니다.
|
참조 |
|
적용 분야
| 방법 | 바이오마커 | 이미지 | PMID |
|---|---|---|---|
| Growth inhibition assay | Cell viability |
|
24824755 |
| Western blot | BNIP3 Smac / Cyt C p53 / Cox IV p-AKT / AKT APE1 / Bcl-2 / p53 / p-p53 / NF-κB |
|
24824755 |
임상시험 정보
(데이터 출처 https://clinicaltrials.gov, 업데이트 날짜 2024-05-22)
| NCT 번호 | 모집 | 조건 | 스폰서/협력자 | 시작일 | 단계 |
|---|---|---|---|---|---|
| NCT05338931 | Recruiting | B-cell Non Hodgkin Lymphoma |
AbClon |
March 15 2022 | Phase 1|Phase 2 |
| NCT00934076 | Withdrawn | Carcinoma Non Small Cell Lung |
University of Alabama at Birmingham|Ascenta Therapeutics |
February 2010 | Phase 1 |
| NCT00561197 | Terminated | Locally Advanced Esophageal or GE Junction Cancer |
Ascenta Therapeutics |
August 2007 | Phase 1|Phase 2 |
기술 지원
자주 묻는 질문
질문 1:
Is it S2812 (-)-gossypol or another enantiomer?
답변:
It is the R-(–)-gossypol acetic acid.
제품은 연구용으로만 사용됩니다. 인체에는 사용하지 마십시오. 환자에게 판매하지 않습니다.
©Copyright 2013 Selleck Chemicals. All Rights Reserved.