연구용

UNC1999 Histone Methyltransferase 억제제

제품 번호S7165

UNC1999는 세포 자유 분석에서 EZH2 및 EZH1의 강력하고 경구 생체 이용률이 높으며 선택적인 억제제로, 각각 2 nM 및 45 nM의 IC50을 가지며, 광범위한 후성유전학적 및 비후성유전학적 표적에 대해 1000배 이상의 선택성을 보입니다. 이 화합물은 강력한 autophagy 유도제입니다. H3K27me3/2를 특이적으로 억제하고 항증식, 분화 및 apoptosis를 포함한 다양한 항백혈병 효과를 유도합니다.

UNC1999 Histone Methyltransferase 억제제 Chemical Structure

화학 구조

분자량: 569.74

바로가기

품질 관리

배치: 순도: 99.86%

99.86

관련 타겟	HDAC JAK BET PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK Histone Acetyltransferase
기타 Histone Methyltransferase 억제제	Pinometostat (EPZ5676) 3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride BIX-01294 trihydrochloride EPZ015666 (GSK3235025) EPZ004777 MM-102 (HMTase Inhibitor IX) Chaetocin SGC 0946 EPZ005687 UNC0638

세포 배양, 처리 및 작업 농도

세포주	분석 유형	농도	배양 시간	제형	활성 설명	PMID
human MCF10A cells	Function assay		72 h		Inhibition of EZH2 in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K27me3 level after 72 hrs by Western blot analysis, IC50=0.124 μM	25406853
human MCF10A cells	Cytotoxic assay				Cytotoxicity against human MCF10A cells assessed as cell viability by Alamar Blue assay, EC50=19.2 μM	25406853
클릭하여 더 많은 세포주 실험 데이터 보기

화학 정보, 보관 및 안정성

분자량	569.74	화학식	C₃₃H₄₃N₇O₂	보관 (수령일로부터)	3년-20°C분말
CAS 번호	1431612-23-5	SDF 다운로드		원액 보관	1년-80°C용매에 보관 1개월-20°C용매에 보관
동의어	N/A			Smiles	CCCC1=C(C(=O)NC(=C1)C)CNC(=O)C2=C3C=NN(C3=CC(=C2)C4=CN=C(C=C4)N5CCN(CC5)C(C)C)C(C)C

용해도

In vitro
배치:

DMSO : 100 mg/mL (175.51 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (175.51 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (175.51 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 25 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (175.51 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (175.51 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

몰농도 계산기

질량	농도	부피	분자량
=	×	×

희석 계산기 분자량 계산기

In vivo 배치:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Selleck 연구소에서 검증되었습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.	5.000mg/ml (8.78mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Selleck 연구소에서 검증되었습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.	1.250mg/ml (2.19mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 25 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

투여량: mg/kg 동물 평균 체중: g 동물당 투여량:μL 동물 수:

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH₂O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘

특징	The first orally bioavailable inhibitor against wild-type and mutant EZH2 as well as EZH1.
Targets/IC₅₀/Ki	EZH2 (Cell-free assay) 2 nM EZH1 (Cell-free assay) 45 nM
시험관 내(In vitro)	UNC1999는 시험관 내에서 EZH2 Y641N 및 EZH2 Y641F 돌연변이 모두에 대해 높은 효능을 가집니다. 이 화합물은 MCF10A 세포에서 H3K27me3의 농도 의존적 감소를 유발하며 IC50은 124 nM이지만, 낮은 세포 독성을 보입니다. EZH2Y641N 돌연변이를 포함하는 DLBCL 세포주에서 EC50이 633 nM인 강력하고 농도 의존적인 세포 증식 억제를 나타냅니다. 또한, 생체 표지된 UNC1999는 HEK293T 세포 용해물에서 EZH2를 풍부하게 하며, 따라서 화학단백질체학 연구에 사용될 수 있습니다.
키나아제 분석	섬광 근접 분석
키나아제 분석	메틸전달효소 활성 분석은 PRC2-EZH2 삼량체 복합체 (EZH2:EED:SUZ12), PRC2-EZH1 오량체 복합체 (EZH1:EED:SUZ12:RBBP4:AEBP2), SETD7, G9a, GLP, SETDB1, SETD8, SUV420H1, SUV420H2, SUV39H2, MLL1 사량체 복합체 (MLL:WDR5:RbBP5:ASH2L), PRMT1, PRMT3, PRMT5-MEP50 복합체 및 SMYD2에 대한 섬광 근접 분석(SPA)을 사용하여 S-아데노실메티오닌 (3H-SAM)으로부터 생체 표지된 펩타이드 기질로 삼중수소 표지된 메틸 그룹의 통합을 모니터링하여 수행됩니다. SMYD2 및 SMYD3에 대한 반응 완충액은 50 mM Tris pH 9.0, 5 mM DTT, 0.01% TritonX-100; G9a, GLP 및 SUV39H2에 대한 반응 완충액은 25 mM 인산칼륨 pH 8.0, 1 mM EDTA, 2 mM MgCl₂ 및 0.01% Triton X-100; 다른 HMT에 대한 반응 완충액은 20 mM Tris pH 8.0, 5 mM DTT, 0.01% TritonX-100입니다. 효소 반응을 중지시키기 위해 10 μL의 7.5 M 염산 구아니딘을 첨가하고, 이어서 180 μL의 완충액을 첨가하고 혼합한 후 384웰 FlashPlate로 옮깁니다. 혼합 후, 반응 혼합물을 인큐베이션하고 Topcount 플레이트 리더를 사용하여 CPM 수를 측정합니다. 각 데이터 세트에서 이 화합물이 없을 때의 CPM 수는 100% 활성으로 정의됩니다. 효소가 없을 때, 각 데이터 세트의 CPM 수는 배경 (0%)으로 정의됩니다. IC50 값은 100 nM에서 100 μM 범위의 화합물 농도를 사용하여 결정됩니다. IC50 값은 SigmaPlot 소프트웨어를 사용하여 결정됩니다. EZH2-Y641F 분석은 20 mM Tris pH 8, 5 mM DTT, 0.01% Triton X-100, 5 μM SAM 및 1 μM H3 (1-24) 펩타이드 (야생형 PRC2-EZH2 복합체와 동일)에서 30 nM 효소를 사용하여 수행됩니다. DNMT1의 경우, 분석은 헤미메틸화된 dsDNA를 기질로 사용하여 수행됩니다. dsDNA 기질은 Eurofins MWG Operon에서 합성한 두 개의 상보적 가닥 (생체 표지된 순방향 가닥: BGAGCCCGTAAGCCCGTTCAGGTCG 및 역방향 가닥: CGACCTGAACGGGCTTACGGGCTC)을 어닐링하여 준비됩니다. 반응 완충액은 20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 5mM DTT, 0.01% Triton X-100입니다. DOT1L에 대한 메틸전달효소 활성 분석은 필터 플레이트를 사용하여 수행됩니다. 20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 5 mM DTT, 2 mM MgCl₂ 및 0.01% Triton X-100의 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하고, 100 μL의 10% TCA를 첨가하고 혼합한 후 필터 플레이트로 옮깁니다. 플레이트는 2분 동안 2000 rpm으로 원심분리한 후 2번의 추가 10% TCA 세척과 한 번의 에탄올 세척 (180 μL)을 거쳐 원심분리합니다. 플레이트를 건조하고 100 μL의 MicroO를 첨가하고 원심분리합니다. 70 μL의 MicroO를 첨가하고 Topcount 플레이트 리더를 사용하여 CPM을 측정합니다.
생체 내(In vivo)	UNC1999 (150 및 50 mg/kg, i.p.)의 처리는 생체 내에서 24시간 동안 이 화합물의 혈장 농도가 세포 IC50 이상으로 나타나는 결과를 가져옵니다. 또한, 쥐에서도 경구 생체 이용률이 있어 만성 동물 연구를 더 실용적이고 편리하게 만듭니다.
참조	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23614352/ [2] http://www.thesgc.org/chemical-probes/UNC1999

적용 분야

방법	바이오마커	이미지	PMID
Western blot	H3K27Me3 / Cleaved PARP / LC3B H3K27me2 / H3K27me1 / H3K27ac / H3K4me3 / H3K9me2 / H3K36me2		27449082
Immunofluorescence	EZH2 / H3K27me3 NF-κB		23614352
Growth inhibition assay	Cell viability		27449082

기술 지원

취급 설명서

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

다른 문의사항이 있으시면 메시지를 남겨주세요.

product.CellLines}	product.AssayType}	product.Concentration}	product.IncubationTime}	product.Formulation}	product.ActivityDescription}	PMID

희석 계산기

스톡 솔루션 준비에 필요한 희석을 계산하십시오. Selleck 희석 계산기는 다음 방정식을 기반으로 합니다.

농도 _(시작) x 볼륨 _(시작) = 농도 _(최종) x 볼륨 _(최종)

이 방정식은 일반적으로 다음과 같이 약칭됩니다. C1V1 = C2V2 ( 입력 출력 )

*스톡 용액을 준비할 때는 항상 바이알 라벨 및 MSDS / COA (온라인에서 사용 가능)에 있는 제품의 배치별 분자량을 사용하십시오.

연속 희석 계산기 방정식

연속 희석

농도 (시작):

희석 배율:

계산된 결과

C1=C0/X	C1:		LOG(C1):
C2=C1/X	C2:		LOG(C2):
C3=C2/X	C3:		LOG(C3):
C4=C3/X	C4:		LOG(C4):
C5=C4/X	C5:		LOG(C5):
C6=C5/X	C6:		LOG(C6):
C7=C6/X	C7:		LOG(C7):
C8=C7/X	C8:		LOG(C8):